土壤中全硒的测定.doc

前 言 本标准由中华人民共和国农业部种植业管理司归口提出,由农业部发布。 本标准起草单位：农业部肥料质量监督检验测试中心（武汉）、华中农业大学资源与环境学院。 本标准主要起草人：王忠良、何迅、巩细民、邓银霞、易妍睿、贺立源、向心炯。 本标准为首次发布。 土壤中全硒的测定 1 范围 本标准规定了用原子荧光光谱法、氢化物原子吸收光谱法和荧光法测定土壤中全硒的方法。 本标准适用于各种土壤中全硒的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法。 3 试剂和材料 除非另有规定，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂。本标准所述溶液如未指明溶剂，均系水溶液。 3.1 水，GB/T6682，二级。 3.2 硝酸，优级纯，ρ(HNO3)约为1.42g/mL。 3.3 高氯酸，优级纯，ρ(HClO4)约为1.60g/mL。 3.4 盐酸，优级纯，ρ(HCl)约为1.19g/mL。 3.5 硼氢化钾碱性溶液：8g/L。 称取2g氢氧化钠溶于200mL水中，加入4g硼氢化钾，搅拌至溶解完全，加水至500mL，用定性滤纸过滤，贮存于塑料瓶中备用。 3.6 硼氢化钠溶液：10g/L。 称取1g硼氢化钠（NaBH4）和0.5g氢氧化钠溶于去离子水，稀释至100mL（现用现配）。 3.7 环已烷:ρ为（0.778～0.80）g/mL。 3. 8 硝酸-高氯酸混合酸：硝酸（优级纯）V1，高氯酸（优级纯）V2，V1+V2=3+2。 3.9 硫酸溶液：优级纯，（1+1）。 3.10 盐酸溶液: 优级纯，（1+1）。 3.11 盐酸溶液：c（HCl）=0.1mol/L。 3. 12 碳酸氢钠溶液：c（NaHCO3）=0.5mol/L。 3. 13 氨水溶液：1+1。 3.14 盐酸羟胺-乙二胺四乙酸二钠（EDTA）溶液。 称取10gEDTA溶于500mL水中，加入25g盐酸羟胺使其溶解，用水稀释至1000mL。 3. 15 2,3-二氨基萘溶液（暗室中配制）：1g/L。 称取0.1g2,3-二氨基萘于150mL烧杯中，加入100mL盐酸溶液（3.11）使其溶解，转移到250mL分液漏斗，加入20mL环已烷（3.7）振荡1min，待分层后弃去环已烷，水相重复用环已烷处理3次～4次。水相放入棕色瓶中上面加盖约1cm厚的环已烷，于暗处置冰箱保存。必要时再纯化一次。 3. 16 硒标准储备液：ρ（Se）=100mg/L。 精确称取0.1000g元素硒（光谱纯），溶于少量硝酸（3.2）中，加2mL高氯酸（3.3），置沸水浴中加热3h～4h蒸去硝酸，冷却后加入8.4mL盐酸（3.4），再置沸水浴中煮5min。准确稀释至1000mL，其盐酸浓度为0.1mol/L。混匀。 3.17 硒标准使用液：ρ（Se）=0.05mg/L。 将硒标准储备液（3.16）用0.1mol/L盐酸溶液稀释成1.00ml含0.05μg硒的标准使用液，于冰箱内保存。 3. 18 甲酚红指示剂：0.2g/L。 称取0.02g甲酚红于400mL烧杯中，加水溶解，加氨水溶液（3.13）1滴，使其溶解后加水稀释到100mL。 4 仪器与设备 4. 1 分析实验室通常使用的仪器设备。 4. 2 无色散原子荧光分析仪：配有硒特种空心阴极灯。用于氢化物发生—原子荧光光谱法。 4.3 原子吸收分光光度计：配有氢化物发生器和硒空心阴极灯。用于氢化物发生—原子吸收分光光度法。 4. 4 荧光光度计：配有光程为1cm石英比色杯。用于荧光法。 4. 5 自动控温消化炉。 5 试样的制备 取风干后的土样，用四分法分取适量样品后，全部粉碎过0.149mm孔径筛，混匀后用磨口瓶或塑料袋装，作为测定全硒的待测样品。 6 氢化物发生—原子荧光光谱法 6.1 原理 样品经硝酸-高氯酸混合酸加热消化后，在盐酸介质中，将样品中的六价硒还原成四价硒，用硼氢化钠（NaBH4）或硼氢化钾（KBH4）作还原剂，将四价硒在盐酸介质中还原成硒化氢（SeH2），由载气（氩气）带入原子化器中进行原子化，在硒特制空心阴极灯照射下，基态硒原子被激发至高能态，在去活化回到基态时，发射出特征波长的荧光，其荧光强度与硒含量成正比。与标准系列比较定值。本方法最低检测量为1.0ng。 6.2 分析步骤 警告：待测样品消化过程中，谨防蒸干，以免爆炸。 6.2.1试样溶液的制备 称取待测样品2g（精确0.0002g