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第六章 染色体与基因组学 本章重点 染色体核型分析 染色体形态、结构和数量变异 基因组及基因组学 第一节 染色体 一、染色体分带 用特殊的染色方法,使染色体产生明显的色带(暗带)和未染色的明带相间的带型(banding patterns)形成不同的染色体个性,以此作为鉴别单个染色体和染色体组的一种手段,这就是染色体分带技术。 1、染色体分带的主要类型 (1)Q带(Q-banding) 也叫荧光分带法。它是利用氮芥喹吖因荧光染料对染色体染色,在荧光显微镜下染色体显示出明暗不同的带纹,一般富含AT碱基的DNA区段表现为亮带,富含GC碱基的区段表现为暗带。 优点:分类简便,可显示独特的带型。 缺点:标本易褪色,不能做成永久性标本。 (2)G带(Giemsa-banding) 将染色体制片,经盐溶液、胰酶或碱处理,再用吉母萨染料(Giemsa)染色,染色体的全部长度上显示丰富的带纹,称为G带。一般富含AT碱基的DNA区段表现为暗带。G带方法较简单,带纹较清晰、精细,可制成永久性的标本。 (3)C带(C-banding) 染色体标本经一定浓度的酸(HCl)及碱〔Ba(OH)2〕变性处理,再经2xSSC在60℃中温育1小时,最后用Giemsa染料染色显带。此法主要显示异染色质,常染色质只能显出较淡的轮廓。 (4)N带(N-banding) 又称Ag-As染色法。主要用于染核仁组织区的酸性蛋白质。 (5)R-带(Reverse-banding) 染色体用磷酸盐溶液进行高温处理,然后用吖啶橙或吉母萨染料进行染色,其显示的带型同G-带和Q带明暗相间的带型正好相反,即Q带、G-带显带的部位,R带不显,反之,在Q带、G-带显带弱的部位,R带为深染区,故R-带也叫反带。 (6)T-带(terminal-banding) 对染色体末端区的特殊显带法,能够产生特殊的末端带型。 2、染色体分带的应用 (1)核型分析 例:黑麦草属的6个种,不用分带时,核型完全一样,用分带分析后不仅发现了彼此的区别。 小黑麦经C带染色证明:在小黑麦的染色体中具末端带的染色体来自黑麦,无末端带的来自小麦。 (2)亲缘关系的鉴定 例:野生稻和栽培稻,野生大豆和栽培大豆等亲缘关系相近,他们的主要带纹基本一致。 (3)染色体工程的细胞学鉴定 在染色体工程中,分带技术常用来鉴定染色体的变迁情况。 二、 染色体核型分析 1. 概念 根据染色体的长度、着丝点位置、臂比、随体等特征,借助染色体分带技术对生物的染色体进行分析、比较、排序、编号就是染色体核型分析,也叫染色体组型分析。 ∵不同物种的染色体有各自特定的形态结构,这种形态特征是相对稳定的。 ∴核型分析是研究物种演化、分类以及染色体结构、形态与功能关系的重要手段。 2、核型分析的方法 (1)确定染色体数目 每一种生物的染色体数目是恒定的,多数园林植物是二倍体。通常用2n和n表示,如栽培牡丹2n=10,n=5;野生牡丹属2n=24,n=12。 (2)确定染色体的形态特征 包括染色体的绝对长度、相对长度、臂比、着丝点指数、着丝点的位置、随体的有无等。 长臂/短臂1.00~1.70:中部着丝粒染色体(M,m); 长臂/短臂1.71~3.00:近中部着丝粒染色体(sm); 长臂/短臂3.01~7.00:近端部着丝粒染色体(st); 长臂/短臂 >7.0:端部着丝粒染色体(t,T)。 (3)染色体分类 将染色体进行分组排队,着丝粒类型相同,相对长度相近的分一组,同一组的按染色体长短顺序配对排列,各指数相同的染色体配为一对,可根据随体的有无进行配对,将染色体按从长到短的顺序排列排队,短臂向上,并写出核型公式。 如:凤丹白牡丹 2n = 2x =10= 6m+2 sm+2 st; 野牡丹 2n=10m(2SAT)+14sm (4)核型描述 A、包括基本染色体数、染色体的形状、大小、副缢痕的数目、位置、随体的数目、形状、大小,染色体相对长度与绝对长度,以及常染色质和异染色质的分布与大小等。 B、核型一般分为两类: 一是对称核型,指主要有中部和近中部着丝粒染色体组成的核型; 另一类是不对称核型,指由大小差异很大、着丝粒多为端部或近端部染色体组成的核型。 三、染色体的形态变异 1 、A染色体和B染色体 一般把真核细胞染色体组中的任何正常染色体,包括常染色体和性染色体,称为A染色体,把超过正常染色体数目以外的染色体,称为B染色体。 B染色体又称副染色体或额外染色体,一般比正常染色体小,主要由异染色质组成。减数分裂时自身配对无规律,也不与
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