中华蟾蜍DNA条形码鉴定.pdfVIP

2017年 1月 第 19卷 第 1期 中国现代中药 ModChinMed Jan．2017 Vo1．19 No．1 · 专题 · 中华蟾蜍 DNA条形码鉴定△ 赵群 ，张恬 ，高波 ，李灯林 ，杨艳。，李军德 (1．中国中医科学院 中药资源中心，道地药材国家重点实验室培育基地，北京 100700； 2．皖西学院，安徽 六安 237012；3．安徽华润金蟾药业股份有限公司，安徽 淮北 235000) [摘要] 目的：通过DNA条形码研究鉴别中药材中华蟾蜍 曰 gargarizansCantor及其混伪品的可行性。方法： 从 GenBank下载了6种蟾蜍属 、2种林蛙属Rana、1种侧褶蛙属Pelophylax和 1种小鲵属Hynobius的COI线粒体 基因DNA序列。用ClustalX1．81和BioEdit软件分别对序列进行比对和编辑。利用MEGA4．0软件按照Kimura双参 数法计算种内和种问的遗传距离。用贝叶斯法和简约法构建系统发育树对中华蟾蜍进行鉴定。结果：构建的系统发 育树表明，中华蟾蜍的所有样本聚类为一个单系，能很好地与其他混伪品区分。结论：COI条形码DNA序列能够对 中药中华蟾蜍进行准确鉴定。 [关键词] 中华蟾蜍；细胞色素C氧化酶 I亚基基因；条形码；鉴定 IdentificationofBufogargarizansandItsAdulterantsbyDNABarcodingTechnique ZHAOQun ，ZHANGTian，GAOBo，LIDengLin ，YANGYan’，LIJunDe” (1．NationalResourceCenterfor ineseMateriaMedwa，ChinaAcademyD厂ChineseMedwalSciences， StateKeyLaboratoryBreedingBaseofDao—diHerbs，Beng，100700，PR．China； 2．耽 sAnhuiUniversity， ’an237012，P R．China； 3．A “ ina ResourcesjinchanPharmaceuticalCo．，Ltd．，Huaibe235000，P R．China ) [Abstract] Objective：TostudythefeasibilityofusingDNAbarcodingtechniquetoidentify曰咖 gargarizansandits adulterantsbasedonCOIgene．Methods：SequencesofpartialmitochondrialDNAfromcytochromeoxidasesubunitI(COI) geneof6speciesfromBufo，2speciesrfomRana，1speciesfromPelophylax，and1speciesrfomHynobiusweredownloaded rfom theGenBankdatalibrary．TheCO1sequenceswerealignedandeditedusingClustalX 1．81andBioEdit7．0．9．0software， respectively．Theinterspecificand intraspecific geneticdistancesofdifferentsequenceswere calculated by Kimura double praametermethodusingsofwtareMEGA 4．0．Basedonallthealignednad edited COIsequences，thephylogeneticnaalyses wereconductedusingBayesianinference(BI)nadmaximumparsimony(MP)toidentifyB．gargarizansna