重组木聚糖酶对马尾松kp浆预处理工艺的研究 a study on the pretreatment with genetic recombination xylanase of masson pine kraft pulp.pdfVIP

技术 2010 进步 TEchnology 8 重组木聚糖酶 对马尾松KP浆预处理工艺的研究 a a a b ⊙ 王玉秀 童国林 尤纪雪 欧阳嘉 （南京林业大学 a.江苏省制浆造纸科学与技术重点实验室；b.生物化工研究所，南京 210037） 摘 要： 研究了马尾松KP浆基因重组木聚糖酶预处理工艺条件的选择及 酶处理后浆料中糖组分的降解情况。结果表明，木聚糖酶预处理的最佳 工艺条件为：pH值约为6.0；温度50℃；浆浓5%；处理时间2.5h；最佳酶用量 为10IU/g。这说明该重组木聚糖酶能在偏中性环境下具有较好的酶学稳 定性，适应于制浆造纸领域的生物漂白过程。利用高效液相色谱（HPLC） 对酶解液分析发现：酶解液中基本不含葡萄糖，说明在酶处理过程中纤 维素并没有发生降解。 关键词：马尾松硫酸盐浆；重组木聚糖酶；预处理 中图分类号: + 文献标志码: 文章编号: 王玉秀，在读硕士研究生，主要 TS743 .14 A 1007-9211(2010)03-0052-04 研究方向：制浆化学及生物制浆 技术。 化学制浆与漂白常常给环境带来巨大污染，而生物 中糖分降解的情况，探讨酶处理对纸浆强度的影响，从 方法可以避免化学法带来的弊端。目前用于生物漂白的 而为其工业化应用提供理论基础。 酶主要是木聚糖酶，且已产业化[1，2] 。但传统的木聚糖 酶主要由真菌和细菌产生，其在分泌木聚糖酶的同时 1的材料与方法 或多或少会分泌一定量的纤维素酶，其存在虽有利于 1.1的材料 [3] 改善纸浆的漂白性能 ，但势必会对纤维素造成损伤， 1.1.1的浆料 使纸浆强度下降，得率降低。所以无纤维素酶活的木聚 马尾松KP浆由福建青山纸业股份有限公司提供， 糖酶的生产对扩大其在造纸工业中的应用非常关键。另 原浆卡伯值28.5，白度25.62%ISO，粘度1021.6ml/g。 外，传统木聚糖酶的酸碱作用领域有限，对于大部分真 1.1.2的木聚糖酶 菌木聚糖酶来说最适pH一般是5.0，这很难满足制浆 实验所用木聚糖酶由通过基因重组的工程菌产 造纸工业的高pH环境。为了解决这一问题，所用木聚糖 生，由南京林业大学生物化工研究所提供。里氏木霉 酶通过从传统的合成木聚糖酶的里氏木霉中克隆木聚 RutC-30、大肠杆菌(E. coli)DH5α在实验室条件下 + + 糖酶的基因，利用毕赤酵母外源表达体系来实现其分 保存；毕赤酵母表达载体pPIC9K(Amp Kan )和毕赤 [4] - 泌 。本文对在该体系中合成的木聚糖酶对马尾松KP 酵母菌株GS115(His )购自Invitrogen公司，木聚糖酶