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小麦Ο簇毛麦6VS6AL易位系叶片cDNA文库构建及鉴定.PDF
南京农业大学学报 2001 , 24 ( 1) : 5～8
Journal of Nanjing Agricultural University
小麦簇毛麦 6 VS/ 6AL 易位系叶片 cDNA 文库构建及鉴定
牛吉山 于玲 陈佩度 刘大钧
(南京农业大学农业部作物细胞遗传重点开放实验室 , 南京 210095)
摘要 : 用表达型质粒载体p SPORT 1构建了经白粉菌 ( Erysip he graminis) 诱导 48 h 和未经诱导的小麦簇毛麦 6VS/ 6AL 易位系
( Triticum aestivumHay naldia villosa translocation line) 叶片 cDNA 文库各一个。文库宿主菌为 E. coli DH10B 。非诱导文库包
含约 50 万个重组 cDNA 克隆 , 平均插入片段为 125 kb , 主要分布在 400 bp ～22 kb 。诱导文库包含约30 万个重组 cDNA
( )
克隆 , 平均插入片段 12 kb 。用克隆的病程相关基因 pathogenesis related gene 小麦类甜蛋白基因 p WIR 作探针 , 进行杂
交筛库 , 杂交信号明显 , 重复性好。
关键词 : 小麦簇毛麦 6VS/ 6AL 易位系; cDNA 文库 ; 白粉菌; 诱导
中图分类号: S5121034 文献标识码 : A 文章编号 : (2001)
cDNA library construction and identification of Triticum
aestivumHaynaldia villosa 6 VS/ 6AL translocation line
Niu Jishan , Yu Ling , Chen Peidu and Liu Dajun
( Key Laboratory of Crop Cytogenetics , Minrstry of Agriculture , Nanjing Agric Univ , Nanjing 210095 , China)
Abstract : Two cDNA libraries of Triticum aestivumHay naldia villos a 6VS/ 6AL translocation line were constructed using mRNA from
SPORT 1
leaves of its plants induced and noninduced with Erysip he graminis . An expression plasmid p introduced into E. coli DH10B was
used as cloning vector. The cDNA library of pathogen induced translocation line comprised of about 300 000 recombinant cDNA clones with
average insert size of 12 kb , and that of noninduced translocation line consisted of aproximately 500 000 recombinant cDNA clones w
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