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富含多糖的野生西瓜果实rna提取方法研究studyonthemethodsof.pdfVIP

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富含多糖的野生西瓜果实rna提取方法研究studyonthemethodsof

分子植物育种( 网络版), 2013 年, 第 11 卷, 第 1014-1018 页 Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2013, Vol.11, 1014-1018 研究报告 Reseach Report 富含多糖的野生西瓜果实 RNA 提取方法研究 刘景安 1,2 , 郭绍贵 2 , 张海英 2 , 任毅 2 , 宫国义 2 , 许勇 2 1. 中国农业科学院蔬菜花卉研究所, 北京, 100081; 2. 国家蔬菜工程技术研究中心, 北京, 100097  通讯作者:xuyong@ ;  作者  分子植物育种, 2013 年, 第 11 卷, 第 3 篇 doi: 10.5376/.2013.11.0003 这是一篇采用 Creative Commons Attribution License 进行授权的开放取阅论文。只要对本原作有恰当的引用, 版权所有人允许并同意第三方无条 件的使用与传播。 引用格式( 中文) : 刘景安等, 2013, 富含多糖的野生西瓜果实 RNA 提取方法研究, 分子植物育种(online), 11(3): 1014-1018 (doi: 10.5376/.2013.11.0003) 引用格式(英文) : Liu et al., 2013, Study on the Methods of Total RNA Extraction from Wild Type Watermelon Fruit with Rich Polysaccharides, Fenzi Zhiwu Yuzhong (online) (Molecular Plant Breeding), 11(3): 1014-1018 (doi: 10.5376/.2013.11.0003) 摘 要 野生西瓜果实富含多糖类物质,果实组织高质量 RNA 提取困难。为解决这一问题,本研究把 SDS 法、改良 CTAB 法和改良LiCl 沉淀法等三种常规RNA 提取方法与本研究提出的改良 SDS 法对野生西瓜PI296341-FR (Citrullus lanatus subsp. Lanatus)果肉 RNA 提取效果进行了比较和分析。结果表明只有改良 SDS 法能够在保证 RNA 质量和产率的同时有效去除多 糖。与常规 SDS 法相比,改良 SDS 法增加了醋酸钾缓冲液(5 mol/L, PH 6.0)和无水乙醇(1/4 体积)共同沉淀多糖的步骤,但醋 酸钾缓冲液用量仅需 1/100 体积。改良 SDS 法提取的总 RNA 完整性、纯度和产率较为理想,28S rRNA 和 18S rRNA 条带清 晰,无降解;OD260nm/OD280nm 比值为 1.97,OD260nm/OD230nm 比值为 1.91;RNA 提取产率为 15~20 μg •g-1 •FW-1 ,可满足后续 分子生物学实验的要求。 关键词 野生西瓜;多糖;RNA 提取;改良 SDS 法 Study on the Methods of Total RNA Extraction from Wild Type Watermelon Fruit with Rich Polysaccharides Liu Jingan1,2 , Guo Shaogui2 , Zhang Haiying2 , Ren Yin2 , Gong Guoyi2 , Xu Yong2 1. lnstitute of Vegetables and Flowers, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing, 100081, P.R.China 2. National Engineering Research Center for Vegetables, Beijing, 100097, P.R. China  Corresponding author, xuyong@ ;    Authors Abstract For wild watermelon, it’s hard to isolate the high quality RNA from t

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