核素内标结合固相萃取测定动物肌肉组织中16种同化激素残留.PDFVIP

虫堡亟随匡堂塞壶塑§生!!旦筮丝鲞筮!!翅￡垦i塾』旦!!丛鲤，丛!!!地望!塑§：Y丛生!：塑垒!! ．检验技术． 核素内标结合固相萃取测定动物肌肉组织 中16种同化激素残留 吴平谷王强 应永飞赵永信 宋国良徐小民 同化激素及其类似药物用于动物养殖，导致激 固相萃取柱规格为500rag／6ml(杭州福裕科技服务 素残留，残留的激素通过食物链进人人体，影响人体 有限公司)。 的激素平衡，引起儿童性早熟等。我国、欧盟许多国 二、标准溶液 家都禁止激素类药物用于动物养殖。国内外对激素 1．同化激素储备液(1．0 mg／m1)：分别称取上 残留的测定方法主要有气相色谱一质谱法(GC— 述16种同化激素10mg于10Illl容量瓶中，用甲醇 MS)¨引、液相色谱一质谱法(LC—MS)∞刁o，GC—MS在溶解并定容至刻度，存放在冰箱中备用，标准使用液 激素残留测定中灵敏度高、适用性广而被广泛使用， 用甲醇稀释至0．1斗g／ml。 Daeseleire等¨1采用GC—MS测定牛肌肉、尿样中24 2．D8．己烯雌酚、D8．黄体酮、D4一雌二醇(100．0 种激素残留；陈捷等J、秦燕等№J、黄士新等r列分别 采用GC—MS、LC．MS测定9～10种激素残留。核素 合液。 内标技术已经广泛应用于微量、痕量组分定量测 三、样品处理 定【8驯；固相萃取技术用于样品的分离、净化和浓缩， 1．样品酶解：称取5．0 g经绞碎均匀的动物肌 简化了样品预处理过程，9J。笔者先酶解动物肌 肉置于50ml离心管中，加40山内标使用液，加入 肉，通过溶剂萃取、固相萃取柱净化，衍生后采用 15IIll 8，加 pH5．2的醋酸缓冲液，用匀质机匀质20 GC—MS测定16种激素残留，内标法定量。 入50斗lp一葡糖苷酸酶一芳基硫酸酯酶液，在37℃水 浴中酶解16h后取出冷却，4000 rain，分 g离心10 材料与方法 出上清液，加入20IIll叔丁基甲醚，在旋涡混匀器上 一、仪器与试剂 混合，静止分层后，将叔丁基甲醚层移入旋转蒸发瓶 6890 GC一5973MS色质联用仪(美国Agilent公 中，水相用20llll叔丁基甲醚重复萃取一次，合并叔 司)；超声清洗器、旋涡混匀器、匀质机(德国IKA公丁基甲醚层，在40℃水浴中蒸发至5“左右，移入 司)。已烯雌酚、双烯雌酚、己烷雌酚、雌二醇、雌三 5 ml乙酸乙 ml刻度试管中，40℃氮吹仪吹干，用1 醇、雌酮、甲基睾丸酮、睾丸酮、丙酸睾酮、黄体酮、戊 酯．正己烷(体积比为3：97)溶液溶解后待用。 酸雌二醇、氯烯雌醚、炔诺醇、醋酸甲地孕酮、左炔诺 2．样品净化：取SLH固相萃取柱，先用甲醇 孕酮、炔诺酮、醋酸甲羟孕酮、B一葡糖苷酸酶一芳基硫 3