工业化废水处理反应器污泥总dna提取方法-微生物学报.pdfVIP

微生物学通报 OCT 20, 2008, 35(10): 1659~1663 Microbiology © 2008 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ 生物实验室 工业化废水处理反应器污泥总DNA 提取方法 * 张 苏 刘 春 杨景亮 郭建博 李再兴 ( 050018) 摘 要: 根据工业化废水处理反应器污泥特性, 对常规的溶菌酶-SDS-酚/ 氯仿环境样品总DNA 提 取方法进行改进, 增强样品预处理, 强化细胞裂解, 提高杂质去除效率, 获得了一种工业化污泥 总DNA 提取的通用方法, 并采用该方法对石家庄若干实际运行的工业化厌氧、好氧反应器的污泥 样品进行了总DNA 提取研究。结果表明, 该方法对所选污泥样品均有效, 具有普适性。提取的污 泥总DNA 杂质含量少, 纯度高, A260/ A280 在1.8左右; 提取效率较高, 总DNA 产率都在0.7 mg/g 以上, 最大产率可达0.85 mg/g 。所提取的污泥总DNA 可以直接作为模板进行PCR 反应, PCR 产 物直接进行变性梯度凝胶电泳(DGGE), 能够得到较好的 DGGE 谱图, 表明该方法提取的污泥总 DNA 样品可满足后续分析研究的要求。 关键词: 工业化废水处理反应器, 厌氧/好氧污泥, 总DNA, 提取方法 A Method for Total DNA Extraction of Sludge Samples from Full-scale Wastewater Treatment Bioreactors * ZHANG Su LIU Chun YANG Jing-Liang GUO Jian-Bo LI Zai-Xing (School of Environmental Science and Engineering, Hebei University of Science and Technology, Shijiazhuang 050018) Abstract: According to the characteristics of sludge samples from full-scale wastewater treatment bioreac- tors, the essential total DNA extraction method for most environmental samples, lysozyme-SDS-phenol/ chloroform method, was modified to improve sample pretreatment, intensify cell lysis and enhance the effi- ciency of impurity removal. Obtain a general total DNA extra