毕赤酵母工程菌在不同培养基中生长的研究.pdfVIP

河南大学学报 (医学版) 2013年 11月 第 32卷 第 4期 273 毕赤酵母工程菌在不同培养基中生长的研究 赵炎葱 ，李景华 ，刘 敏 (1．河南大学东京医院检验科，河南 开封 475001；2．河南大学 天然药物与免疫X-程重点实验室，河南 开封 475004) 摘 要：目的 确定重组PichiapastorisGS115Muts菌株更适合的培养基和最佳接种时间。方法 采用3种不同 的培养基(YPD培养基、BMGY培养基争复合培养基)培养重组PichiapastorisGS115Muts菌株，分别在4h和24h 的时间间隔下，采用比浊法对酵母菌96h内的生长进行OD值测定。结果 复合培养基和YPD培养基是 3种培 养基较为合适的，且在 12～24h之间是重组酵母茵的对数生长期，此时是接种的最佳时间。结论 合适的培养基 和适当的接种时间对 巴斯德毕赤酵母(Pichiapastoris)的培养关系密切 。 关键词：毕赤酵母 ；培养基；发酵 中图分类号：R318．0 文献标识码 ：A 文章编号：1672—7606(2013)O4一O273一O3 Theeffectthatdifferentculturemedium giveto thegrowth ofPichia pastorisyeaststrain ZHAO Yancong ，LIJinghua，LIU Min (1．TheFirstHospitalAffiliatedtoHenanUniversity，Ka g，Henan475001，China；2．KeyLabofNatural Medicineand ImrnunalEngineering，Ka ng，Henan475004，China) Abstract：0bjective ThisExperimentistestingthemostsuitableculturemedium andtherighttimewhentheseed liquidismostapplicable．Methods Therearethreekindsofculturemedium inthisexperiment—YPD，BMGY，and compoundculturemedium ．Theyareused toreform anew strainnamedPichiapastorisGSj15Mut．The0D iS testedevery4and24hours，within96hours，inthewayofturbidimetricmethod．Results Thecompoundculture medium andtheYPD arethebetterculturemedium inthreemediums．Andthebesttimetovaccinateistheperiod between12and24 hours．Conclusion Pichia PastorisyeaststrainiscloselyrelatedtOthesuitablemedium and appropriateinoculationtime． Keywords：Pichiapastoris culturemedium ；fermentation 毕赤酵母 (Pichiapastoris)是近十几年兴起 的 基因工程菌的高密度培养是外源蛋 白被宿主菌 真核表达系统，此系统具有原核生物发酵速度快 、简 高效表达的一个重要途径 ，也是当前发酵领域的一个 便的特点。是在外源蛋 白表达方面应用 比较广泛 的 重要研究方向_4]。在重组毕赤酵母 的发酵工艺中，培 一 套工具。到 目前为止，已成功表达了200多种来 自 养的 目的是扩增菌体，其直接影响后续的发酵效果是 病毒、细菌、真菌、动植物和人的蛋 白，如人 白介素、人 否优质。中国工程院院士沈倍奋[5提出制约 目前产 血清 白蛋 白、乙肝表面抗原、水蛭素衍生物等。自 物产量和质量的瓶颈之一就是优化培养基和培养条 Cregg等[1在 1987年发现外源蛋 白还可表达于甲醇 件 。王洪刚[6在对质粒转染效率的研究发现，质粒的 营养型毕赤酵母以来，此表达系统表达的外源蛋 白包 种类剂量及转染细胞的浓度直