草酸青霉菌产酶条件优化及其秸秆腐解能力.pdfVIP

第 30卷 第3期 农 业 工 程 学 报 、，o1．30 No．3 170 2014年 2月 TransactionsoftheChineseSocietyofAgriculturalEngineering Feb．2014 草酸青霉菌产酶条件优化及其秸秆腐解能力 耿丽平 ，陆秀君2，赵全利 ，高宁大 ，刘文菊1,3-~ (1．河北农业大学资源与环境科学学院，保定 071001；2．河北农业大学植物保护学院，保定 071001 3．国家北方山区工程研究中心，保定 071001) 摘 要：目前还田的玉米秸秆存在腐解难的特点，如何加速玉米秸秆腐解成为国内外研究的热点。该试验采用纤 维素_冈0果红染色法从河北山前平原小麦．玉米轮作且长期秸秆还田的土壤中分离筛选到一株纤维素酶活性高的真 菌。将测得的ITS基因序列与NCBI数据库上进行同源性比对，综合形态特征和 ITS基因序列同源性分析，该菌 株鉴定为草酸青霉 (Penicilliumoxalicum)。该文对其产酶条件和玉米秸秆分解能力进行了进一步研究。结果表明， 在羧甲基纤维素钠 (CMC—Na)液体培养基和玉米秸秆液体培养基上 30℃培养72h，内切葡聚糖酶 (CMCase酶) 和滤纸酶 (FPase酶)活性分别达672．8、282．9和774．6、618．3U；以玉米秸秆为底物其产天然纤维素总酶活性可 达到376．1u，说明该菌具有较强的玉米秸秆分解能力。该菌最佳产酶条件为：0．3％的牛肉膏蛋白胨为氮源，接种 量为5％，培养温度为28~35C，pH值=4～7，培养48~96h；最优发酵条件为固液比为 1：10，培养时间为48h， 培养温度为30~C，pH值为6．5。该菌株对玉米秸秆腐解能力的研究表明，在秸秆摇瓶试验中，培养 10d后，秸秆 腐解率达87．3％，为对照的1．90倍；在土壤培养试验中，培养45d时，腐解率达83．5％，是对照的 1．62倍；在玉 米秸秆还田的小麦盆栽试验中，培养65d时，秸秆腐解率达70．8％，高于对照 15．1％。因此，从原位秸秆还田土 壤中筛选出来的草酸青霉对玉米有较强的腐解能力。 关键词：秸秆；酶；纤维素；土壤；腐解；草酸青霉菌 doi：10．3969~．issn．1002—6819．2014．03．023 中图分类号：S154．39；Q939．96 文献标志码：A 文章编号：1002—6819(2014)一03—0170—10 耿丽平，陆秀君，赵全利，等．草酸青霉菌产酶条件优化及其秸秆腐解能力[J]．农业工程学报，2014，30(3)： 170— 179． GengLiping，LuXiujun，ZhaoQuanli，eta1．Optimizationofenzyme-productionconditionsofPenicilliumoxalicumnad itsabiliytfordecompositionofstalks[J]．TransactionsoftheChineseSocieytofAgriculturalEngineering(Transactionsof hteCSAE)，2014，3O(3)：170—179．(inChinesewithEnglishabstract) 存在腐解难，不利于农民田间作业等问题，因此如 0 引 言 何加速玉米秸秆腐解，使其无害化、资源化已成为 农作物秸秆是 自然界中存在最丰富的一类可 国内外研究的热点L3J。由此可见，如何提高秸秆中 再生资源，中国是农业大国，年产各种农作物秸秆 纤维素的腐解效率是秸秆再利用的关键问题。利用 约7．0亿 t，占世界秸秆总产量的20％～30％…。据 微生物产生纤维素酶来分解和转化纤维素则是纤 报道，除了一小部分用于纺织、造纸、饲料和燃料 维素利用的有效途径L4J。自1906年Seilliere在蜗牛 加工外，大部分作为废弃物被丢弃焚烧，不仅浪费