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中国饲料 2010年第9期
ELISA法检测配合饲料 中
黄 曲霉素 B1前处理方法的改进研究
成都市产品质量监督检验院 周 浩 王利娜 李俊霞 肖全伟 刘 英
摘【要】用酶联免疫吸附测定法(ELISA)法检测配合饲料 中黄 曲霉毒素 B (AFB)的含量 ,关键在于样品的前处
理 。本文对配合饲料 中AFB,的前处理作 了方法改进 。结果表 明:改进后 的前处理方法较 国标方法能显著地提高
AFBI的检 出量 ,与高效液相色谱法(HPLC)法数据一致 ,且改进方法加标回收理想,平均回收率为87.3%~94.5%。
[关键词1酶联免疫吸附测定法;配合饲料 ;黄 曲霉毒素B;前处理 ;方法改进
【中圈分类号】$816.17 文【献标识码】A [文章编号】1004-3314(2010)09-0040-02
fAbstract]Thekeytothedeterminationof胡atoxinB】(AFBj)in也efomrulafeedbyenzymelinkedimmunoserl:lent
assayfELISA)issamplepretreatment.Theevaluationofmethodwasstudiedinthispaperaccordingtothepretreatmentof
theformulafeed.Resultsshowedhtattheimprovingmethodcouldimproveevidentlyhtedetemr inationdataofAFB1,hte
dataofELISAwasequaltohighperfomranceliquidchromatography (HPLC),andhteAFBlrecoveryof theimproving
methodwasgood.theaveragerecoveryratewas87.3% 一94.5%.
K【eywords】ELISA;fomrulafeed;aflatoxinBl;pretreatment;improvement
黄 曲霉毒素 B (AFB)具有极强 的致癌性和 联免疫定量测试盒 (江苏省苏微微生物研究所有
致突变性。动物采食了被 AFB。污染的饲料后,可 限公司)。
引起急性病变死亡 ,还可 以在体 内蓄积或者经新 1.2 设备 酶标仪 (奥地利 Sunrise—basic);恒温
陈代谢转化成其他有毒物质在体 内分布(居乃琥, 生化培养箱 (日本三洋 MIR一253);高效液相色谱
1980)。人若食用了这些受 AFB 污染的动物组 仪(戴安Ultimate3000)。
织,健康将遭受严重威胁,因此饲料中的AFB检 1-3 样品来源 本实验所用配合饲料样品均从
测受到高度重视。AFB 易溶于甲醇、氯仿和乙腈 成都地区饲料生产厂 (公司)购买,共计 20组 ,另
等有机溶剂 ,难溶于水和石油醚 (陈炳卿 ,2000)。 外实验 带有 FAPAS (FoodAnalysisPerformance
由于配合饲料 中组成成分复杂 ,且添加 了一定的 AssessmentScheme)动物饲料样品。
营养强化剂以及重金属离子(赵春城等,2003),使 2 实验方法
得样品的前处理困难 .提取过程中易出现干扰 、乳 2.1 样品的提取
化现象,导致不彻底提取。针对前处理过程中易出 2.1.1 国标方法 按照国标 GB/T17480—2008提
现的干扰。本文作了方法的改进研究。 取方法 :称取 5g(精确至 O.01g)试样置于 100mL
1 材料 具塞三角瓶中.加入甲醇水溶液 25mL,加塞振摇
1.1 主要试剂 甲醇水溶液 :量取 50mL甲醇, 10min,过滤 ,弃去 1/4初滤液后收集滤液。准确
加 50mL水 ;乙腈水溶液
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