PCR技术检测海运船舶压载水病原弧菌初探.pdf

浙 江 大 学 学 报 (理学版) JournalofZhejiangUniversityfScienceEdition) 第 37卷第 3期 http：／／www．journals．zju．edu．cn／sci VMo1．37No．3 ay 2010 2O1O年 5月 DOI：10．3785／i．issn．1008—9497．2010．03．018 PCR技术检测海运船舶压载水病原弧茵初探 霍颖异 ，许 学伟 ，王春生 ，黄 雷。，吴 刚。，吴 敏 (1．浙江大学 生命科学学 院，浙江 杭州 310058；2．国家海洋局海洋生态系统与生物地球化学重点实验室 国家海洋局第二海洋研究所 ，浙江 杭州 310012；3．舟 山出入境检验检疫局 ，浙江 舟 山 316000) 摘 要 ：船舶压载水引起的外来物种入侵 ，及 由此引发的经济、环境 和卫 生等 方面的灾害性后 果，已成 为 当前世界 海洋所面临的最大威胁之一．弧茵作为一种广泛存在于海洋环境 的病原微生物，其数量 已成为船舶压栽水是否可 以排放 的一项指标．本文采用PCR扩增病原弧菌特征基因技术 ，结合弧菌相关 16SrRNA基 因文库 ，初步探计压载 水 中病原弧茵快速检测技术．从采集 自舟 山远洋船舶压载水水样 S1中，检测到 hlyA 和 vvh基 因，表明样品中舍有 霍乱弧茵(VibriocholetdP)和创伤弧菌(．vulnificus)的毒力基 因．文库序列分析结果显示 ，重组克隆子 中部分序 列与副溶血弧菌(．parahaemolyticus)和费氏弧菌(．fischeri)相似性较高．研究结果表明，压载水样品 S1中舍 有 多种对人和动植物有害的病原弧菌 ，对海洋生态平衡 、公共卫生安全和海洋养殖业具有潜在危害． 关 键 词 ：压栽水；病原弧菌 ；聚合酶链式反应 ；毒力基 因 中图分类号 ：Q939 文献标志码 ：A 文章编号 ：1008—9497(2010)03—330—05 HUOYing—yi，XUXuewei·。*，WANGChunsheng，HUANGLei。，wUGang。，wUMin (1．CollegeofLife Sciences，ZhejiangUniversity．Hangzbou310058，China；2．LaboratoryofMarineEcosys~em andBiogeo~hemis— try．SecondInstituteofOceanography，StateOceanicAdministration·Hangzhou310012，China；3．Zhoushan Entry—exitInspectionandQuarantineBureau，Zhoushan316000，ZAejiangProvince，China) DetectionofpathogenicVibriointheballastwaterbypolymerasechainreaction．JournalofZhejiangUniversity(Sci— enceEdition)，2010，37(3)：33O一 334 Abstract：Thepotentialofballastwatertoactasamajorvectorforinvasivealienspecieshaslongbeenrecognised． Invasivealienspeciescausedbyballastwaterfrequentlyoutcompeteorpreyonnativespeciesandspreaddiseasesto plants，animals，andhuman．Theyoftenencroachon