‘粉红亚都蜜’葡萄NAC转录因子基因VvDRL1的功能初步分析.pdfVIP

园艺学报，2016 ，43 (4) ：643 –652. Acta Horticulturae Sinica doi ：10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0707；http ：//www. ahs. ac. cn 643 ‘粉红亚都蜜’葡萄NAC 转录因子基因 VvDRL1 的功能初步分析 * 闫朝辉，李桂荣，穆金燕，娄航通，朱自果 （河南科技学院园艺园林学院，河南新乡 453003 ） 摘 要：以欧洲葡萄 ‘粉红亚都蜜’为材料，利用同源克隆法获得 1 个 NAC 转录因子，命名为 VvDRL1 （GenBank ：XP-002281816 ）。该基因全长 840 bp，编码 280 个氨基酸，与‘黑比诺’葡萄中该基因的同 源性为 100%，但是基因组 DNA 序列中存在 6 处单核苷酸突变。瞬时转化洋葱表皮细胞进行亚细胞定位 分析，VvDRL1 基因主要在细胞核内表达，属于核蛋白；通过农杆菌介导的叶盘法获得稳定整合的转基因 烟草，T2 代转基因植株生长迟缓，株高、叶面积和叶片细胞面积约为野生型烟草的 60%、34%和 31%， 转基因植株叶片出现向内卷曲现象，利用石蜡切片进行显微结构观察，转基因植株主叶脉上表皮下缺 失 2 ~ 3 层厚壁细胞，且海绵组织内的空隙明显多于野生型植株。研究结果表明，VvDRL1 在调控植株的 形态发育方面起着重要作用。 关键词：葡萄；NAC 转录因子；矮化；卷叶 中图分类号：S 661.1 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2016 ）04-0643-10 Subcellular Localization and Functional Analysis of a NAC Gene VvDRL1 from Vitis vinifera ‘Yatomi Rosa ’ * YAN Chao-hui ，LI Gui-rong ，MU Jin-yan ，LOU Hang-tong ，and ZHU Zi-guo （College of Horticulture and Landscape Architecture，Henan Institute of Science and Technology ，Xinxiang ，Henan 453003 ，China） Abstract ：In this study ，a NAC gene，VvDRL1，was isolated from Vitis vinifera ‘Yatomi Rosa ’. The length of full VvDRL1 was 840 bp ，encoding 280 amino acids，which shared a 100% similarity in cRNA and 6 single nucleotide mutation in DNA with ‘Pinot Noir ’. Subcellular localization showed that VvDRL1 is a nuclear protein. Transgenic tobacco with VvDRL1 was obtained by Agrobacterium -mediated method. Compared with the wild type，the growth of T2-generation transgenic tobacco presented delayed with the plant height ，leaf area and mesophyll cells area of about 60%，34% and 31% in comparison with wild tobacco plants. In addition ，the transgenic tobacco showed curly leaves. Th