教案13 体外受精与核移植动物.pptVIP

（3）电泳分离法 利用精子表面电荷差异采用电泳进行分离。精子 带负电荷，Y精子负电荷略小于X精子，因此在中 性缓冲液中，X精子向阳极移动的速度较快。 优点是操作方便，缺点是分离效率不高。 （2）免疫学分离法 Y精子上存在雄性特异性组织相容性抗原（H-Y 抗原），利用H-Y抗体检测精子质膜上是否存在 HY抗原，以此分离X精子（H-Y抗原阴性）和Y 精子（H-Y抗原阳性）。 主要有免疫亲和柱层析法和免疫磁珠法。目前这 个方法仅限于小规模实验研究，准确性较低。 * （4）流式细胞仪分离法 根据X、Y精子上DNA含量的微小差别，通过流 式细胞仪(Flowcytometer)进行分离。 首先将精子稀释并与荧光染料Hoechst 33342混 合，这种染料可以定量地与DNA结合。精子通过 检索仪时被激光束激发，由于X精子比Y精子含较 多的DNA，X精子放射出较强的荧光信号。 放射出的信号通过计算机系统分辨X精子和Y精子。 借助两块各自带正电或负电的偏斜板，把X或Y精 子分别引导到2个收集管中。 * 2 胚胎移植前性别鉴定 细胞生物学方法：通过判定胚胎细胞性染色体是 Ｘ还是Ｙ来鉴定胚胎的性别。 分子生物学方法：根据Y染色体上的SRY基因的 有无进行鉴别，可以采用PCR或FISH等分子方 法进行确定性别。 生化免疫学方法：H-Y抗原检测法 * 对于人类，世界范围内不孕夫妇占10％左右，中国约有40