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CRISPR-Cas系统基因修饰技术(最终版)
CRISPR-Cas系统基因修饰技术;CRISPR-Cas:一种来源是细菌获得性免疫的由RNA指导Cas蛋白对靶向基因进行修饰的技术。;CRISPR-Cas主要由两部分组成:;2 CRISPR-Cas系统的发现;2 CRISPR-Cas系统的发现;CRISPR-Cas系统赋予原核细胞针对外源DNA特异性免疫, 而这种特异性是由间隔序列(spacer)决定的。在宿主防御噬菌体攻击中,针对自然界中庞大的噬菌体种群,细菌进化了CRISPR 介导的适应性免疫。这种免疫功能的发挥是由CRISPR 间隔序列的动态性变化,即通过增加或删除间隔序列(spacer)来实现的。;3 Type?II?CRISPR系统—Cas9;;他们发现了?
1)??Type?II?CRISPR系统中的Cas9是个核酸酶,这个核酸酶结合两个RNA(crRNA,?tracrRNA)就可以切割双链DNA.?
2)??同时,他们进一步阐明了RNA和目标DNA配对的原则,同时将crRNA-tracrRNA连接成了chimera?RNA,这样只需要Cas9蛋白和一条定制的RNA就可以编辑特性的DNA。3)??同时他们进一步分析了Cas9作为核酸酶的活性位点:连个核酸酶活性分别切割靶DNA的两条链。
;3 Type?II?CRISPR系统—Cas9;4 Cas9的应用;4 Cas9的应用;2 进一步用Nickase增加编辑特异性;4 Cas9的应用;谢谢
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