胶体金标记氯霉素抗体探针的研究-上海师范大学学报.pdfVIP

( ) 第 3 7卷 第 4期 　　　　　　　　　　 　　　　　上海师范大学学报 自然科学版 Vol. 3 7 , No. 4 ( ) 2 0 0 8 年 8 月　　　　　　　　　　 Jou rnal of Shanghai Norm al Un iversity N atural Sciences 2 0 0 8 , A ug 胶体金标记氯霉素抗体探针的研究 王元凤 , 白亚龙 ,魏新林 (上海师范大学 生命与环境科学学院 , 上海 200234) 摘 　要 : 研究了胶体金标记氯霉素抗体探针的制备方法 ,通过红外光谱 、荧光光谱 、热力学公 式等初步探讨了氯霉素抗体与胶体金的相互作用. 结果表明:胶体金标记氯霉素抗体探针的最 μ 佳 pH 范围为 8～10 , 1mL 胶体金标记的最小蛋白量是 22 g. 红外光谱表明:氯霉素抗体蛋白 与胶体金之间无共价结合 ;荧光光谱表明:胶体金对氯霉素抗体发生静态荧光淬灭 ,经热力学 公式推导 ,两者之间存在比较强的氢键和范德华力. 该研究为氯霉素的胶体金免疫层析技术提 供了一定的理论基础. 关键词 : 氯霉素抗体 ; 胶体金 ; 相互作用 中图分类号 : TS20 1. 6 　　文献标识码 : A 　　文章编号 : (2008) 04 040807 0　引　言 近年来农兽药在食品中的残留已经拉响了我国食品安全的警报 ,其中特别是抗生素等药物的残留 , 已经成为食品安全的主要问题之一. 氯霉素是第一个人工合成的对革兰氏阳性 、阴性细菌均有抑制作用 广谱抗生素 ,因其效价高 ,价格低廉 ,在我国畜牧业中得到广泛应用 ,成为畜禽疾病防治的重要药物 但 是 ,氯霉素存在严重的副作用 ,能引起人类的再生障碍性贫血 、粒状白细胞缺乏症等疾病 , 因此 ,氯霉素 在动物性食品中的残留对人类的健康构成了潜在危害. 欧盟 、美国等发达国家相继禁止或严格限制使用 氯霉素. 美国规定 ,在动物性食品中检出任何氯霉素都是违法的. 欧共体不允许氯霉素用于产奶母牛和 产蛋鸡 ,规定在其他大动物中氯霉素的最高残留限量为 0. 0 1 m g / kg;韩国也规定动物组织中不得检出 氯霉素 ;我国农业部也已禁止使用该药 [ 1 ] . 这就在客观上要求改进传统的检测方法 , 引进先进的检测仪 器 ,寻求快速 、精确的检测方法 ,使得检测结果更加准确 、可靠. 胶体金免疫层析技术是在酶联免疫分析 的基础上发展起来的一种固相标记的小分子化合物免疫测定技术. 该技术的特点是简单 、快速 、不需任 何仪器设备 ,几分钟内便可肉眼观察结果 ,并且检测成本很低 ,顺应了快速检测的发展方向 ,在农兽药检 测领域具有广阔的前景 [ 2 ] . ( ) 免疫层析法 Go ld Imm unoch rom atograp hy A ssay, GICA 是将各种反应试剂以条带状固定在同一试 纸条上 ,待检样品加在试纸条的一端 ,将一种试剂溶解后 ,通过毛细作用在层析条上渗滤 、移行并与膜上 另一种试剂接触 ,样品中的待测物同层析材料上针对待测物的受体发生特异性免疫反应 [ 3 ] . 胶体金标 ( ) 记技术 Co llo idal Go ld L abeling Techn ique 是免疫层析快速诊断的核心技术 ,它以胶体金作为示踪标记 　　　　　　　　　　 收稿 日期 : 基金项 目: 上海 市科 委 技 术标 准 专 项 ( 06D Z05137, 07D Z05027 ) ; 国家 高技 术 研 究发 展 计 划 ( 863 计 划 ) (2008AA 10Z322) .