脂肪源性干细胞对多发性硬化患者th17的免疫-中国病理生理杂志.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2016，32﹙1﹚：51-57 ·51· ［文章编号 ］1000-4718（2016）01-0051-07 脂肪源性干细胞对多发性硬化患者 的免疫调控作用٭ ∆ 1 2 ﹙温州医科大学附属第一医院 超声影像科，神经内科，浙江 温州325000； 3武警浙江省总队杭州医院康复科，浙江 杭州310000﹚ ［摘 要 ］目的：探讨人脂肪源性干细胞﹙hASCs﹚对多发性硬化﹙MS﹚患者外周血辅助性T 细胞17﹙Th17﹚的 免疫调控作用机制。方法：分离、纯化脂肪组织中的hASCs。采用密度梯度离心法分离MS患者外周血单个核细胞 + + ﹙PBMCs﹚，磁珠分选CD4 T 细胞，体外刺激细胞向Th17极化，并加入不同比例的hASCs﹙hASCs:CD4 T 为1:4 和 + 1:10﹚共培养4 d，设立添加anti-LIF 抗体组；流式细胞术检测共培养后Th17细胞占CD4 T 细胞的比例，real-time PCR 检测白细胞介素6受体﹙IL-6R﹚、白细胞介素23受体﹙IL-23R﹚、白血病抑制因子受体﹙LIFR﹚、维甲酸相关孤儿 受体 t﹙ROR t﹚及白血病抑制因子﹙LIF﹚的mRNA 水平变化；ELISA 法检测共培养体系上清液中LIF 的水平。结 γ γ 果：分离的hASCs经流式细胞术鉴定可基本判定为hASCs；PBMCs经磁珠法分选后获得90% 以上纯度的CD4+ T 细胞。共培养后，1:4组和1:10组中Th17细胞所占比例下降，且存在高浓度抑制效应；共培养后ROR t、IL-6R 和 γ IL-23R 的mRNA 表达水平下降，LIFR 和LIF 的mRNA 表达水平均升高；加入anti-LIF 抗体后，Th17细胞比例回升 至对照组水平；ROR t和IL-6R 的mRNA 表达水平回升；ELISA 检测各组LIF 的水平，共培养组LIF 分泌均较对照 γ 组明显增多，加入anti-LIF 抗体后明显减少。结论：hASCs可抑制MS患者Th17细胞的分化，其作用可能与其分泌 LIF、通过IL-6/LIF 轴竞争性抑制有关。 ［关键词 ］多发性硬化；脂肪源性干细胞；Th17细胞；白血病抑制因子；白细胞介素6 ［中图分类号 ］R741.05 ［文献标志码 ］A doi：10.3969/j.issn.1000-4718.2016.01.009 2 2 3 2 2 ，CHEN Ying ，YANY