自制nse单抗的鉴定及其双抗夹心elisa方法的建立-core.pdfVIP

·922 · 中国免疫学杂志 20 12 年第 28 卷 doi: 10 ． 3969 /j ． issn． 1000-484X． 2012 ． 10 ． 013 · · 免疫学技术 与方法 自制 NSE 单抗 的鉴定及 其双抗夹心 ELISA 方法的建立① 丁焕弟 林志妙 杨 赟 于 占娇 龚慧婷 李晓彤② ( ， 361005 ) 厦门大学生命科学学院杂交瘤抗体 中心 厦门 中国图书分类号 R392． 11 文献标识码 A 文章编号 1000-484X( 2012) 10-0922-05 ［ ］ : NSE( Neuron-specific enolase) ， NSE ELISA 。 摘 要 目的 制备并鉴定 单克隆抗体 建立可检测 蛋白 的双抗夹心 方法 : NSE BALB / c ， 。 WB 、IP 、IF 、IHC 方法 用本实验室 已表达纯化 的 融合蛋白免疫 小鼠 采用杂交瘤技术制备单克隆抗体 采用 等 NSE 。 NSE ， NSE 方法对获得 的 单抗进行鉴定及亚型检测 利用辣根过氧化物酶标记纯化后 的 单抗 建立一个可检测 蛋白 的双 ELISA 。 : ， 2 NSE ， 4 ． 2 × 107 ～ 6． 5 × 107 ， 抗夹心 法 结果 通过分析和鉴定 选定 株可稳定分泌抗 抗体 的杂交瘤细胞株 效价达 亚 IgG2b 。 ， NSE ， NSE ， 型为 免疫印迹结果显示 该抗体不仅能识别细胞 内源 蛋白 还能识别分泌到细胞培养上清液 中的 蛋白 此 。 ELISA ， 8． 85 ng / ml 。 : 外还可用于免疫荧光及免疫组化检测 文 中所建立 的双抗夹心 法 最低检测极 限为 结论 成功获得 了效 、 NSE ， ELISA ， 。 价高 灵敏度好及特异性强 的 单抗 建立 了一个双抗体夹心 检测系统 具有 良好的临床应用前景 ［ ］ ( NSE) ; ; ; ELISA 关键词 神经元特异性烯醇化酶 单克隆抗体 鉴定 双抗体夹心 C