说明书和标签20160308.docVIP

附件2 一、猪肺炎支原体ELISA抗体检测试剂盒说明书和标签 兽用 【兽药名称】 通用名 猪肺炎支原体ELISA抗体检测试剂盒 商品名 无 英文名 Mycoplasma Hyopneumoniae ELISA Antibody Test Kit 汉语拼音 Zhufeiyan Zhiyuanti ELISA Kangti Jiance Shijihe 【主要成份与含量】 成分 含量 抗原包被板 96孔/板，5板/盒 阳性对照血清 4.0ml/瓶，1瓶/盒 阴性对照血清 4.0ml/瓶，1瓶/盒 样品稀释液 200ml/瓶，1瓶/盒 酶结合物 1.0ml/瓶，1瓶/盒 酶稀释液 100ml/瓶，1瓶/盒 10倍浓缩洗涤液 200ml/瓶，1瓶/盒 底物A液 100ml/瓶，1瓶/盒 底物B液 1.0ml/瓶，1瓶/盒 终止液 50ml/瓶，1瓶/盒 使用说明书 1份/盒 封板膜 10张/盒 【作用与用途】 用于检测猪血清中的猪肺炎支原体抗体。 【用法与判定】 1 用法 1.1 样品准备 取动物全血，待血液凝固后，以3000r/min离心10分钟，收集清。也可采集血液，待凝固后自然析出血清，要求血清清亮，无溶血。 1.2 洗涤液配制 使用前，10倍浓缩洗涤液应恢复至室温，并摇动使沉淀溶解（最好在37水浴中加热溶解5～10分钟）。然后使用蒸馏水或去离子水作10倍稀释（如：10ml浓缩洗涤液加入90ml水）。 1.3 样品稀释 用样品稀释液将待检血清进行40倍稀释（如10μl样品加入390μl样品稀释液）。注意：不要稀释对照血清。取每个样品后都要更换吸头，准确记录每个样品在板上的位置。 1.4 酶结合物工作液配制 酶结合物和酶稀释液应在使用前恢复至室温。使用前将酶结合物用酶稀释液2000倍稀释（如5μl酶结合物加入10ml酶稀释液）。 1.5 操作步骤 1.5.1 使用前将试剂盒恢复至室温。试剂应轻轻旋转或振荡予以混合。 1.5.2 取抗原包被板（根据样品多少，可拆开分多次使用），记录样品的位置。 1.5.3 将阳性对照血清、阴性对照血清和稀释好的待检血清依次加入抗原包被板，每样2孔，每孔100μl，轻轻混匀孔中样品（勿溢出），用封板膜封好，置37温育30分钟。 1.5.4 弃去孔中液体，每孔加入稀释好的洗涤液350μl，静置3分钟后，弃去洗涤液，重复洗板3次，并在吸水纸上拍干。 1.5.5 每孔加入酶结合物工作液100μl，用封板膜封好，置37温育60分钟。 1.5.6 弃去孔中液体，洗涤3次，方法同1.5.4项。 1.5.7 将底物A液和底物B液按80:1比例混合后，每孔100μl。盖好封板膜，置37避光显色15分钟。 1.5.8 每孔加入终止液50μl，10分钟内测定结果。 2 判定 在酶标仪上测定各孔 OD450nm值。试验成立条件是：阳性对照平均值（PC）减去阴性对照平均值（NC）必须≥0.150；阴性对照平均值（NC）必须≤0.150。抗体是否存在是由样品A（OD450）平均值与阳性对照平均值的比值决定。样品的相对抗体水平可以通过样品与阳性对照的比值（S/P）来决定。如果样品S/P＜0.35，判为阴性；如果样品0.35≤S/P≤0.45，判为可疑；如果S/P＞0.45，判为阳性。 其中，S/P值为样品的相对抗体水平，计算公式为： S/P值= （2）试剂盒使用前，各试剂和血清样品应平衡至室温，使用后放回2～8℃保存。未用完的酶标板条须与干燥剂一起用自封袋密封，置2～8保存。 （4）底物和终止液不能暴露于强光或接触抗氧化剂。 （5）使用终止液及底物B液时应注意安全，避免直接接触，如溅到皮肤、眼睛上，应立即用大量清水冲洗。 （6）试剂盒的某些成分含有防腐剂叠氮钠。处理时需要用大量的水冲洗以免形成叠氮化铜或叠氮化铅，它们在受压时可以爆炸。 （7）在检测血清样品时，应稀释完所有血清样品，再加到抗原包被板上，使反应试剂一致。 （8）稀释10倍浓缩洗涤液时，如发现有结晶，应加热使其溶解后再使用。 （9）移液时，应尽量准确，防止气泡产生。 （10）严格按照操作程序，仔细地吸液和洗涤，保持精确和准确。 （11）一旦开始实验，完成所有步骤，不要中断。 （12）所有的废弃物在丢弃前应进行无害化处理。 【规格】 5板（480孔/盒 2～8℃保存，有效期为6个月。 【批准文号】 【生产企业】 仅供兽医诊断使用 （二）猪肺炎支原体ELISA抗体检测试剂盒标签 兽用 猪肺炎支原体ELISA抗体检测试剂盒 5板（480孔）/盒