ALT、GGT和IL28B基因多态性和PEG干扰素联合利巴韦林治疗HCV基因型1患者早期应答相关性.docVIP

ALT、GGT和IL28B基因多态性和PEG干扰素联合利巴韦林治疗HCV基因型1患者早期应答相关性 　　目前针对慢性丙型肝炎（Chronic hepatitis C， CHC）的标准治疗方案为聚乙二醇干扰素（Pegylated interferon， PEG-IFN）联合利巴韦林（Ribavirin， RBV），但获得持续病毒学应答（Sustained virogic response， SVR）的患者只有54%-63%，感染丙型肝炎病毒（Hepatitis C virus，HCV）基因型1的患者SVR率仅为40-50% [1，2]。影响治疗效果的因素既有宿主因素，也有病毒因素。宿主因素包括白细胞介素28B（Interleukin 28B， IL28B）基因多态性、年龄、性别、种族、肝纤维化程度和肥胖等，病毒因素包括HCV基因型、病毒载量、治疗过程中病毒的动力学等[3]。其中IL28B基因多态性是CHC患者治疗SVR最强的预测因素[4]。 由于PEG-IFN治疗费用昂贵且副作用严重，在治疗前剔除治疗效果不好的患者既节约费用又可减少患者痛苦。尽管IL28B基因rs129798600 CC基因型患者应答率显著高于CT及TT基因型患者，但一项基于中国人群的研究表明HCV基因型1且CC基因型的患者SVR为63.49% [5]。完全早期病毒学应答（Complete early virologic response， cEVR， 定义为治疗第12周检测不到血清HCV RNA）是SVR最可靠的预测指标之一 [6]。最近国外的一项研究表明，γ-谷氨酰转移酶（γ-glutamyl transferase，GGT）活性可以在IL28B基因型基础上进一步对PEG-IFN联合RBV治疗CHC患者的应答做出预测[7]，提示肝功能指标有可能在IL28B基因多态性基础上对CHC治疗应答提供进一步信息。本研究回顾性分析感染HCV基因型1的中国CHC患者rs129798600基因多态性及常用肝功能指标基线水平与cEVR的关系，探讨常规指标是否可以在IL28B基因多态性基础上对HCV基因型1患者的SRV做出进一步的预测，为治疗前剔除难治性患者提供科学参考依据。 1 对象与方法 1.1病例来源对象 本研究的所有对象来自大连市第六人民医院及沈阳传染病医院2009年1月至2012年12月期间的门诊患者。诊断标准符合2004年中华医学会肝病学分会制定的《丙型肝炎防治指南》中的规定。纳入标准为：HCV抗体阳性且HCV RNA阳性；未接受过针对CHC的治疗；具有实验室检测资料；具备全血和血清样本可进行IL28B和HCV基因分型检测；接受PEG-IFN联合RBV标准治疗且具有基线和第12周HCV定量数据。排除标准为：HIV及其它肝炎病毒感染；酒精性或药物性肝病。选择其中HCV基因型1的患者共384例进行分析。 标本收集及核酸提取：所有标本均在患者治疗之前进行收集并分装保存于-80℃。基因组DNA及HCV RNA采用Qiagen离心柱试剂盒，按照说明书进行操作。所有参与患者签署知情同意书并获医院伦理委员会批准。 1.2 主要仪器与试剂 血球计数仪及配套试剂由日本希森美康公司生产，全自动生化分析仪由日本日立公司生产，配套试剂由上海复星诊断生产。荧光定量PCR仪为美国ABI公司产品7500。基因组DNA及HCV RNA提取试剂盒为深圳凯杰生物技术公司产品。HCV RNA采用实时荧光定量PCR试剂盒为深圳凯杰生物技术公司产品，检测下限为100 IU/mL。 1.3 检测方法 IL28B与HCV基因分型：IL28B及HCV基因分型采用测序法检测。提取好的DNA和RNA直接送上海英骏生物技术公司进行测序及结果分析。 1.4 统计学分析 采用SPSS 19.0软件进行统计学分析。等位基因频率进行哈代-温伯格平衡分析。分类变量采用χ2检验或Fisher精确检验。连续变量之间的比较采用t检验。各因素与SVR的关系采用多元Logistic回归分析。P 　　为了进一步研究常规肝功能指标能否对HCV基因型1的患者在IL28B基因分型的基础上对cEVR进行进一步预测，本研究对患者根据rs129798600基因型分为两组，分别进行Logistic条件回归分析，发现对于CC基因型患者，年龄、ALT水平和GGT水平都是cEVR的独立相关因素，年龄低于40岁、ALT水平高于90U/L或GGT正常的患者更容易产生cEVR；而对于CT基因型患者，年龄和总胆汁酸（Tbil）为cEVR的独立相关因素。 由于HCV基因型1感染治疗效果较差，美国肝脏病学会于2011年的更新指南中推荐采用三联疗法进行治疗，即在PEG-IFN和RBV联合治疗的基础上