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中药野艾挥发物抗菌活性和化学成分分离鉴定探究 　　[摘要] 目的 对中药野艾的药用价值进行研究，主要对其挥发物进行抑菌活性研究及化学成分进行分离鉴定，进而为野艾的药用价值寻找依据。 方法 ①采用超临界二氧化碳（CO2）萃取法提取野艾的挥发油，然后测定挥发油对于革兰阳性菌、革兰阴性菌和真菌的杀菌抑制作用；②使用气相色谱-质谱联用仪对挥发油进行化学成分分离鉴定。 结果 ①挥发油对革兰阳性菌杀菌效果较好，对真菌的效果一般，对3种革兰阴性菌无杀菌活性；②分离鉴定出39种成分，野艾挥发油主要成分是蒿酮（15.47%）、蒿醇（9.55%）、顺式丁香烯（8.85%）、艾醇（7.28%）和桉叶素（6.78%）等。 结论 挥发油对所测试的菌落有很好抑制作用，对革兰阳性菌有很好的杀菌作用。 [关键词] 野艾；挥发油；化学成分；抗菌活性 [中图分类号] R284.2 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2014）01（a）-0097-03 野艾属于菊科蒿属草本植物，俗名苦艾、野艾蒿等，是我国的传统中药。艾草性味苦、辛、温，入脾、肝、肾。《本草纲目》记载：艾以叶入药，性温、味苦、无毒、纯阳之性、通十二经、具回阳、理气血、逐湿寒、止血安胎等功效，亦常用于针灸。故又被称为“医草”，现在台湾正流行的“药草浴”，大多就是选用艾草。关于艾叶的性能，《本草》载：“艾叶能灸百病。”《本草从新》说：“艾叶苦辛，生温，熟热，纯阳之性，能回垂绝之阳，通十二经，走三阴，理气血，逐寒湿，暖子宫，……以之灸火，能透诸经而除百病。”说明用艾叶作施灸材料，有通经活络、祛除阴寒、消肿散结、回阳救逆等作用。现代药理发现，艾叶挥发油含量多，1，8-桉叶素（占50%以上），其他有α-侧柏酮、倍半萜烯醇及其酯。风干叶含矿物质10.13%，脂肪2.59%，蛋白质25.85%，以及维生素A、B1、B2、C等。灸用艾叶，一般以越陈越好，故有“七年之病，求三年之艾”（《孟子》）的说法。全草有调经止血?安胎止崩?散寒除湿之效。治月经不调?经痛腹痛?流产?子宫出血，根治风湿性关节炎?头风?月内风等。因它可削冰令圆，又可炙百病，为医家最常用之药。现代实验研究证明，艾叶具有抗菌及抗病毒作用；平喘、镇咳及祛痰作用；止血及抗凝血作用；镇静及抗过敏作用；护肝利胆作用等。艾草可作“艾叶茶”、“艾叶汤”、“艾叶粥”等食谱，以增强人体对疾病的抵抗能力。艾草具有一种特殊的香味，这特殊的香味具有驱蚊虫的功效，所以，古人常在门前挂艾草，一来用于避邪，二来用于赶走蚊虫，因此，对于野艾成分的研究尤其必要。本研究对野艾的挥发油进行提取分离、成分鉴定，并研究其对微生物的杀灭抑制作用。 1 材料与方法 1.1 材料 原材料野艾购于深圳市福田区中医院，产地广东，超临界萃取装置、气相色谱-质谱联用仪等均为国内研发制作。试验所用蒸馏水均采用自动双重纯水蒸馏器制作。菌株均来自武汉大学的菌种保藏中心，实验采用牛肉汁蛋白胨培养基（酵母浸膏1 g，牛肉浸膏4 g，蛋白胨10 g，葡萄糖10 g，琼脂15 g，水1 L，pH= 7.0，121℃灭菌 30 min）培养。 1.2 方法 1.2.1 挥发油提取 采用超临界CO2萃取法进行挥发油提取[1-2]：①将收集的野艾地上部分洗净阴干切碎，称重为8.9 kg，装入萃取装置；②萃取装置温度设置为35℃，通入CO2，排出装置中的空气；③打开压缩机，调节仪器内部压强保持在16 MPa，调节CO2出口阀，保存20 kg/h；持续80 min，打开分离器，取出萃取物；④关闭萃取装置，放空CO2，取出挥发油粗制提取物，然后放入2倍的无水乙醇，搅拌均匀，静止24 h；⑤真空抽滤，再除去蜡质沉淀物，最后将滤液在30°回收乙醇，得到精制野艾挥发油。 1.2.2 抑菌圈测定 试验对野艾挥发油的抑菌效果测定使用的是滤纸片琼脂平板扩散法[3]。首先，在三个固体平板均匀涂上牛肉汁蛋白胨培养液；其次，取已灭菌的滤纸片（7 mm）粘取约15 μL已稀释好的挥发油样品置于平板上，每个菌种取6个平行组；最后，放入培养箱中培养，细菌组温度为36℃，24 h，真菌组温度为27℃，48 h，测算菌落直径3次求取平均值，并以左旋氧氟沙星为对照。 1.2.3 最低杀菌浓度（MIC）和最低抑菌浓度（MBC）的测定 采用稀释法对MCI和MBC进行测定[4]。在96孔的平板上涂上液体培养基、接种菌落、再加入已稀释好的各浓度挥发油样品。放入培养箱中培养，细菌组温度为36℃，24 h，真菌组温度为27℃，48 h，后观察，每个菌种的每个挥发油样品相同稀释度的实验各三组，重复两次。MIC的确定标准[5]：肉眼无法观察到培养基内培养物浑浊的样品为最低抑菌浓度