利用基因芯片鉴定梨品种自交不亲和基因型.pdfVIP

园 艺 学 报 2014 ，41 （10）：1983 –1992 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com 利用基因芯片鉴定梨品种自交不亲和基因型 1,2,* 2 2 1 江 南 ，谭晓风 ，张 琳 ，邓 靖 1 2 （湖南工业大学包装与材料工程学院，湖南株洲 412007 ；中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室， 经济林育种与栽培国家林业局重点实验室，长沙 410004 ） 摘 要：根据东方梨中已鉴定的 46 个 S 基因序列和 S 基因的结构特点，设计了 86 条寡核苷酸探针 并制备成 S 基因寡核苷酸检测芯片，采用 Cy3 荧光修饰引物标记被检测品种的 PCR 产物并与芯片杂交， 以检测不同品种的 S 基因型。结果表明：利用芯片与华梨 2 号、秀玉和德胜香等已知 S 基因型的品种杂 交，杂交信号显示与各品种已知基因型相符合。利用芯片鉴定了丽江黄酸梨等 27 个未知 S 基因型的梨品 种，获得了各品种的 S 基因型，随机选取部分品种进行 DNA 测序和序列分析，结果与芯片杂交结果完全 一致，证明利用 S 基因寡核苷酸芯片鉴定梨品种 S 基因型结果准确可靠。 关键词：梨；自交不亲和；S 基因型；寡核苷酸；芯片 中图分类号：S 661.2 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2014 ）10-1983-10 Identifying Pear Cultivars S-genotypes Using Gene Chips 1,2,* 2 2 1 JIANG Nan ，TAN Xiao-feng ，ZHANG Lin ，and DENG Jing 1 2 （School of Packing and Material Engineering ，Hunan University of Technology ，Zhuzhou ，Hunan 412007 ，China；Key Laboratory of Cultivation and Protection for Non-wood Forest of Ministry of Education ，the Key Laboratory of Non-wood Forest Product of Forestry Ministry ，Central-south University of Forestry and Technology，Changsha 410004 ，China） Abstract ：Based on the structure characteristic of self-incompatibility gene and the gene group sequences of 46 S genes in Oriental pear cultivars ，86 probes for S-RNase detections were designed and oligonucleotide genechip was established. In order to detect the S-genotype of pear cultivars，the PCR products of S-RNase were amplified by Cy