微生物油脂卷枝毛霉中苹果酸酶异构体的解析 identification of malic enzyme isoforms in mucor circinelloides.pdfVIP

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2017-11-26 发布于上海
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微生物油脂卷枝毛霉中苹果酸酶异构体的解析 identification of malic enzyme isoforms in mucor circinelloides.pdf

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微生物油脂卷枝毛霉中苹果酸酶异构体的解析 identification of malic enzyme isoforms in mucor circinelloides

中国油脂 2009年第34卷第8期 CHINAOILSANDFATS 43 油脂化学微生物油脂卷枝毛霉中苹果酸酶异构体的解析周兵 (浙江经贸职业技术学院应用工程系，杭州310018) 摘要：卷枝毛霉(Mucor 酶被认为是该真茵中生物合成多不饱和脂肪酸所需要的重要的酶。采用活性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对卷枝毛霉中的苹果酸酶异构体进行纯化研究，发现其中有至少6种异构体。从不同培养基中分离提取异构体3和4，经过纯化，在SDS—PAGE电泳中分离出一条单一的谱带，用胰蛋白酶消化带胶蛋白，进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI—TOF—MS)分析。结果表明：异构体3和4的相对分子质量非常接近，分别是87．339kDa和86．503kDa。关键词：卷枝毛霉；y一亚麻酸；苹果酸酶；聚丙烯酰胺凝胶电泳活性染色；异构体；基质辅助激光解析电离飞行时间质谱中图分类号：TS222 文献标志码：A Identificationofmalic isoformsinMucorcircinelloides enzyme ZHOU Bing of EconomicTrade (DepartmentApplicationEngineering，Zhejiang 310018，China) PolytechnicCollege，Hangzhou isoformswere nativePAGEandmorethan6isoformswere Abstract：Malic enzyme investigatedthrough 4 found．inwhichisoforms3andwere andoccured the ofMucor predominant consistentlyduringgrowth circinelloides．Thesetwo fromdifferent to andthen isoforms，harvestedcultures，were purifiedhomogeneity with in assistedlaser fMALDI— digestedtrypsingel．Matrix desorptionionization—time—of—flight—MS showedthatisoforms3and4 87．339kDaand kDaofrelativemo- TOF—MS)analysis possesed 86．503 lecular weight，respectively． words：Mucro acid；malic Key circinelloides；7一linolenicenzyme；native TOF—MS 7一亚麻酸(GLA)(20：3，n一6)是一种必需的(eveningprimroseoil，8％一12％)、黑加仑籽油