多花蔷薇胚性细胞悬浮系原生质体分离及再生植株.pdfVIP

园　艺 　学 　报 　2008, 35 ( 10) : 149 1 - 1496 A cta Horticu lturae Sin ica 多花蔷薇胚性细胞悬浮系原生质体分离及再生植株 陈　颖 , 梁建丽 , 陈晓丽 , 郭艳超 , 田传卫 , 赵梁军 (中国农业大学农学与生物技术学院 , 北京 100193) 摘 　要 : 利用多花蔷薇 ‘无刺 3号 ’假珠芽诱导的胚性愈伤细胞悬浮系分离得到原生质体 , 并培养获 得再生植株 。最佳酶液组成是 2 0%纤维素酶 , 05%离析酶 , 50 mmol ·L - 1 M ES, 05 mo l ·L - 1甘露醇 , 05% CaCl ·2H O 。采用继代 3 d 的悬浮细胞系 , 酶解 10 h, 原生质体产量最大 ( 2667 ×106 ·g- 1 ) , 活 2 2 力最高 ( 92 2 1% ) 。采用液体浅层培养 , 肌醇比蔗糖更有利于纯化后的原生质体分裂和生长 。愈伤组织形 - 1 - 1 - 1 - 1 成增殖培养基为 1/2M S + 10 m g ·L 2 , 4D + 02 m g ·L EBR + 10 g ·L F icoll + 500 m g ·L 谷氨 - 1 - 1 - 1 - 1 酰胺 + 20 m g ·L 甘氨酸 + 20 m g ·L 天冬氨酸 , 在 1/2M S + 10 m g ·L TD Z + 500 m g ·L 谷氨酰胺 - 1 - 1 + 20 m g ·L 甘氨酸 + 20 m g ·L 天冬氨酸培养基中分化培养后转入 1/2M S培养基上获得完整植株 。 关键词 : 多花蔷薇 ; 原生质体 ; 细胞悬浮系 ; 植株再生 中图分类号 : S 68512　　文献标识码 : A 　　文章编号 : 0513353X (2008) 10149 106 Protopla st Isola tion and Plan t Regenera tion from Som a tic Em bryogen ic Cell Suspen sion Cultures in R osa m u ltif lora CH EN Ying, L IAN G J ianli,