H1N1猪流感病毒环介导等温扩增快速检测方法的建立.pdfVIP

． — 24—— 中国动物检疫 2010年第 27卷第5期 H1N1猪流感病毒环介导 等温扩增快速检测方法的建立 苏 霞 ，杨 兵 ，周宏专 ，曾作财 ，孙继国 ，赵景义 。，马志军 。，孙丹丹 ，一，陈小玲 z (1．河北农业大学动物科技学院，河北保定 071000； 2．北京市农林科学院畜牧兽医研究所，北京 100097；3．北京市畜牧兽医总站，北京 100029) 摘 要：目的：建立HIN1猪流感病毒环介导等温扩增 (LAMP)快速检测方法。方法：从GenBank中获得H1N1猪流 感病毒血凝素 (HA)、神经氨酸酶(NA)基因序列，应用DNAStar软件MegAlign程序分析其序列，利用PrimerExplor— erV4软件在序列保守区域设计LAMP引物，即外引物和内引物，同时以H1N1猪流感病毒的cDNA作为阳性模板，对 试验中的几个反应条件进行优化。结果：LAMP检测方法对H1N1猪流感病毒的灵敏度达到4～6个拷贝，其引物对于 H9亚型禽流感病毒、猪瘟病毒和猪圆环病毒