梨矮化砧木‘中矮1号’生长素氢转运体基因PcAHS及其启动子的克隆与表达分析.pdfVIP

园艺学报，2015 ，42 (4) ：613 –622. Acta Horticulturae Sinica doi ：10.16420/j.issn.0513-353x.2014-1056；http ：//www. ahs. ac. cn 613 梨矮化砧木‘中矮 1 号’生长素氢转运体基因 PcAHS 及其启动子的克隆与表达分析 1 2 1 1 1,* 汤常永 ，段续伟 ，欧春青 ，王 斐 ，姜淑苓 1 2 （中国农业科学院果树研究所，农业部园艺作物种质资源利用重点实验室，辽宁兴城 125100 ； 中国农业大学农学 与生物技术学院，北京 100193 ） 摘 要：以梨（Pyrus communis L. ）紧凑型矮化砧木‘中矮 1 号’及其母本‘锦香’新梢韧皮部为试材， 根据转录组测序结果设计特异性引物，克隆到 1 个长 1 239 bp 的基因序列。该序列在两个品种间不存在差异， 均编码 412 个氨基酸，其氨基酸序列与苹果（np_001280772.1 ）、梅（xp_008242099.1 ）、毛果杨 （xp_002306421.2 ）、草莓（xp1 ）的生长素氢转运体基因（AHS ）编码的氨基酸序列的相似性在 67% ~ 99%之间，命名为PcAHS 。qRT-PCR 分析发现，‘中矮1 号’新梢韧皮部中PcAHS 的表达量均低于母 本‘锦香’，推测其启动子序列存在差异。‘中矮1 号’及其母本‘锦香’PcAHS 基因上游启动子长度分别 为 828 bp 和 888 bp，二者相似性 89.1%。序列分析发现‘中矮 1 号’PcAHS 基因启动子有一段 58 bp （–496 bp ~ –553 bp ）的缺失；利用植物顺式作用元件数据库PLACE 和 PLANTCARE 分析表明，‘中矮1 号’启 动子含有一个‘锦香’没有的 BPBF 转录因子结合元件 P-box 。推测‘中矮 1 号’PcAHS 基因启动子特有的 片段缺失和 P-box 转录因子结合元件可能是导致其表达量低并通过影响生长素的运输最终引起矮化的原因。 关键词：梨；矮化砧木；生长素氢转运体基因；启动子；克隆 中图分类号：S 661.2 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2015 ）04-0613-10 Isolation and Analysis of PcAHS Gene and Its Promoter from Dwarfing Rootstock ‘Zhongai 1 ’Pear 1 2 1 1 1,* TANG Chang-yong ，DUAN Xu-wei ，OU Chun-qing ，WANG Fei ，and JIANG Shu-ling 1 （Institute of Pomology ，Chinese Academy of Agricultural Sciences，Key Laboratory of Horticultural Crops Germplasm Resourses Utilization 2 ，Ministry of Agriculture ，Xingcheng ，Liaoning 125100 ，China ； College of Agriculture a