二十章-生物制品分析生物制品分析.pptVIP

理化分析法 化学分析方法 电化学分析法 光谱分析法 色谱分析法 重量法 容量分析法 重量法：根据样品中分离出来的单体或化合物的重量测定所含成分的含量的方法。 提取法：用适宜的溶剂提取样品中的某成分后挥去溶剂进行测定的方法。 挥发法：利用被测组分的挥发性，或经过衍生化后将其转化成挥发性物质来进行测定的方法。 沉淀法：将被测组分转化成沉淀，称定沉淀的重量来计算含量的方法。 比色法 利用样品与显色剂发生现色反应，根据反应产物的颜色强度来测定含量。Elson-Morgan 硫酸软骨素的比色法测定：在酸性条件下使样品水解成氨基己糖，再在碱性条件下与乙酰丙酮和二甲氨基苯甲醛反应生成红色的产物，该产物在525 nm处有最大吸收。 光谱分析方法 具体试验操作： 1、制备对照品溶液－氨基葡萄糖 2、制备供试品溶液－硫酸软骨素 3、反应和测定－缩合反应和比色测定 A平为供试品溶液的吸收度 As平为对照品溶液的吸收度 Ws为对照品溶液的浓度（mg/ml） W为称样量（mg） 0.8309为校正因子 500为稀释倍数 以氨基葡萄糖计≥24.0％ 高效液相色谱法 反相高效液相色谱法 RP-HPLC Reversed-phase high-performance liquid chromatography 高效离子交换色谱法 HPIEC High-performance Ion-exchange chromatography 高效凝胶过滤色谱法 HPGFC High-performance Gel-filter chromatography 反相高效液相色谱法 基本原理：利用ODS或C18等极性较小的键合硅胶为填料，以极性较大的methanol-water、CH3CN-H2O为流动相，根据样品在固定相和流动相中的不同保留行为而实现高效分离的一种方法。 可以应用UV、DAD、FD、ELSD、ECD、MS等作为检测器，分离化合物范围广泛。 用HPLC法和氨基酸分析仪测定多维氨基酸片中18种氨基酸 高效离子交换色谱法：主要用于蛋白质、多肽和氨基酸等的分离分析，它是根据相应的离子化程度对样品进行分离的，常用盐浓度逐渐增大的方式进行梯度洗脱的。 2～10 mmol/l的离子对试剂 高效凝胶过滤色谱法 根据生物药物的分子量及其极性来对成分进行分离测定，主要用于生化药物的分离和分子量的测定研究。 分离产物可以回收、可以用少量表面活性剂来改善分离效果、可根据化合物的形状和分子量大小来预测出峰顺序。 具有简便、快速、重现性好、样品用量少等优点。 电泳 ?electrophoresis? 是指溶液中带电粒子 在电场作用下发生迁移的电动现象。 毛细管电泳 ?capillary electrophoresis? 是利用被分析离子在电场作用下移动的速率不同而达到分离的目的，这种技术主要用来分析在毛细管缓冲溶液中能离解为离子的物质。 特 点 瑞典化学家Tiselius建立了“移界电泳”，成功地将人血清中的蛋白质分为5个主要成分，为蛋白质化学的发展奠定了基础。 诺贝尔奖 优点: 操作简单，试样量少，分离效率高，成本低等。 在迁移时间上的重现性，进样的准确性和检测灵敏度方面比高效液相色谱法稍逊。 生物制品分析 Biopharmaceutical Analysis 【基本要求】 1．了解生化药物和基因工程药物定义、种类和特点。 2．熟悉该类药物的质量检验的基本程序与方法。 3．掌握常用的定量分析方法中的色谱分析法。 返 回 化学药物 Chemical drugs 生物药物 Biopharmaceuticals 中药 Traditional Chinese Medicine TCM 第一节：概述 生物药物：是指利用生物体、生物组织或器官等，综合运用生物学、生物化学、免疫学和药学等原理与方法制得的一类药物。 生化药物 Biochemical drugs 生物合成药物 Biosynthetic drugs 生物制品 Biological products 生化药物：生化药物是指从动物、植物及微生物中提取的,或采用生物化学合成和现代生物技术制得的生命基本物质及其衍生物、降解产物以及大分子的结构修饰物等，如氨基酸、多肽、蛋白质等。 生物合成药物：利用现代生物技术研制的一类药物，包括基因工程药物。 基因工程药物：在确定对某种疾病具有预防和治疗作用的蛋白质，进而控制该蛋白质合成过程的基因进行分离、纯化或人工合成，利用重组DNA技术加以改造，最后将该基因导入可以大量生产的受体细胞中，在受体中不断繁殖和表达，进而生产大规模具有复方和治疗疾病的蛋白质。 生物制品：是应用普通的生物技术获得的微生物、细胞及组织等生物材料制备用于人类疾病预防、治疗