盐酸米诺环素脂质体控释凝胶改善大鼠实验性牙周炎作用评价.docVIP

盐酸米诺环素脂质体控释凝胶改善大鼠实验性牙周炎作用评价 　　[摘要] 目的 在动物体内检验盐酸米诺环素脂质体控释凝胶的生物相容性及其对牙周炎动物模型的修复效果。方法 毒性实验：用质量分数2%盐酸米诺环素脂质体控释凝胶溶液给SD大鼠灌胃，观察长期应用该制剂有无全身不良反应及其反应程度。牙周炎动物模型实验：将实验性牙周炎建模成功的SD大鼠分为3 组，A组为派丽奥组，B组为实验药物组，C组为阴性对照组；A、B组每周牙周袋内给药1次，连续56 d，C组给予生理盐水；分别在给药7、14、28、56 d后测量各组动物的牙周探诊深度（PD）和牙龈指数（GI），并进行组织学观察，计算单核细胞和破骨细胞的数目。结果 盐酸米诺环素脂质体控释凝胶具有良好的生物相容性；给药14 d后，PD、GI，以及单核细胞和破骨细胞数目均较其他两组明显降低，组织学观察可见新骨及部分新纤维形成。结论 牙周袋内使用盐酸米诺环素脂质体控释凝胶可减轻牙周炎症，提示该制剂对改善牙周炎有一定的疗效，具有临床应用前景。 [关键词] 脂质体； 盐酸米诺环素； 实验性牙周炎； 动物模型 [中图分类号] R 781.4 [文献标志码] A [doi] 10.7518/hxkq.2013.06.012 四环素族药物是治疗牙周病的代表药物。治疗牙周病时，如果采用全身用药，具有给药剂量大，易产生耐药性等缺点，且局部疗效并不令人满意；随着小剂量四环素类药物具有调节宿主免疫反应这一新的作用机制的发现，各国学者都在积极探索新的给药方法或进行新剂型的开发，已经取得了较大的进展。 四环素类药物局部给药的重要进展是控、缓释剂型的应用，如四环素纤维棒、多西环素凝胶、米诺环素微球等。这种剂型的优点是置入牙周袋内后，药物能缓慢持久地释放，从而达到持续抗菌和有效改善牙周组织的作用，且某些缓释材料可被局部组织吸收，使用方便；可减少给药次数，平均每周给药1次，提高患者的依从性[1]。任蕾等[2]的研究显示，米诺环素对牙周主要致病菌的抑菌效果较好，其抗菌谱较其他药物更为理想，可作为牙周炎急性发作时的首选药物。 脂质体作为一种药物载体，其组成和结构与细胞膜十分相似，渗透力强，能穿透上皮屏障，对网织内皮系统具有趋向性，易被吞噬细胞摄取而实现细胞内给药，提高了药物的生物利用度，减少了给药剂量，可以减轻甚至避免药物的不良反应[3]。本研究通过动物实验检验一种新型盐酸米诺环素脂质体控释凝胶的生物相容性及其对动物牙周损伤模型修复的效果，为其在牙周病治疗中的应用提供实验依据。 1 材料和方法 1.1 实验设备和材料 无龋坏及牙周病的5周龄SD大鼠（四川大学华西动物实验中心）；牙龈卟啉单胞菌ATCC 33277（四川大学口腔疾病研究国家重点实验室）；质量分数2%（每克含20 mg盐酸米诺环素脂质体）盐酸米诺环素脂质体控释凝胶（四川大学华西药学院药剂学实验室）；2%（每克含20 mg盐酸米诺环素）盐酸米诺环素软膏派丽奥。 1.2 盐酸米诺环素脂质体控释凝胶对大鼠的全身毒 性实验 健康SD大鼠20只，实验组和对照组各10只，雌雄各半。实验组：2%盐酸米诺环素脂质体控释凝胶用双蒸水配制成2%样品水溶液；对照组：双蒸水；以每天5 mLkg-1的剂量连续灌胃，30 d后观察2组大鼠的体重变化及临床毒性体征。将灌胃大鼠的肝脏、肾脏组织取出，观察组织病理学变化，评价其组织相容性。 1.3 盐酸米诺环素脂质体控释凝胶对大鼠实验性牙 周炎的影响 1.3.1 大鼠实验性牙周炎模型的建立 选择雌性SD大鼠建立牙周炎动物模型。以10%水合氯醛溶液行腹腔注射麻醉，然后用直径0.2 mm正畸钢丝在左上颌第一磨牙靠近牙龈根方做牙颈部结扎1周，在腭侧近中打结，结扎后在龈沟内接种牙龈卟啉单胞菌ATCC 33277，配10%葡萄糖水喂食[4]。建模后21 d测量牙周探诊深度（probing depth，PD）、牙龈指数（gingival index，GI），制作左上颌第一磨牙及牙周组织切片，通过苏木精-伊红（hematine-eosin，HE）染色法处理后，光学显微镜下观察牙周组织的病理学变化。 1.3.2 实验分组及检测方法 建模成功的78只大鼠，体重（172.5±10.2）g，将其中的72只大鼠（另外6只因操作不当不适于进行下一步实验而被排除）按GI、PD值均衡分成3组，给予不同的药物治疗：A组为阳性对照组，使用派丽奥；B组为实验组，使用2%盐酸米诺环素脂质体控释凝胶；C组为阴性对照组，使用0.9%生理盐水。每组有24只大鼠，分别观察7、14、28、56 d，每个时间段每组检查6只大鼠，检测牙位为左上颌第一磨牙。每组每周牙周袋内给药1次，用药前用探针机械清理牙面，将药物注入