微生物专题英文文献.ppt

Low-energyion implantation has been considered as a new kind of mutation breeding and foreign gene delivery technique. By means of implantation low-energy ions into organisms, the biological effects and the function mechanisms of the technique are investigated, so we can apply the technique to breeding and gene engineering. 　　　The aim of the present study is to screen high xylanase-producing strains by ion implantation technoligy. Then, based on an orthogonal experiment, anoptimal fermentation condition was designed for this high-yield strain. Generally xylan is a major hemicellose component of the cell walls of a higher yield plant.In a pure state it is composed of monomers of D-xylose, linked through β-1,4 glycosidic linkages. The hydrolysis of β-linkages in different polymeric carbohydrates, including xylans, is carried out by several enzymes produced by a wide range of micro-organisms such as fungi, actinomycettes and eubacteria. 木聚糖酶是植物细胞壁的主要之一，属于非淀粉多糖。可作为生物漂白剂用于造纸工业，也可用于生物转化等等。目前木聚糖酶的生产主要还依靠真菌。 对于产酶微生物的育种，国外多采用基因工程手段构建高产菌，而国内多采用传统的诱变方法，如紫外辐射、化学诱变剂处理等，这些诱变手段获得的突变株一般稳定性差、容易产生回复突变且负突变较多及诱变选育的工作量很大，而20世纪80年代末，人们发现离子束可以引起靶物质原子移位和重排，使细胞表面刻蚀和穿孔，并能影响和改变细胞电性等现象，提出了离子束可以用于细胞加工和基因转移的设想，并陆续得到了研究证实，由此产生了国内外普遍关注的离子束生物技术工程学，而且离子束育种是一项具有我国自主知识产权且被国际所承认的定向遗传改良的集物理诱变和化学诱变于一身的综合诱变方法，具有损伤小、突变谱广、突变率高的特点。 供试菌种 黑曲霉A3（褐黑色） 培养基 孢子培养基：马铃薯、葡萄糖、琼脂、去离子水 菌种培养基：PDA培养基 摇瓶发酵培养基：玉米穗、麸皮、（NH4）2SO4、NaNO3 分离培养基：蛋白胨、琼脂、麸皮 矿质元素、生长因子：KH2PO4、MgSO4、FeSO4、CoCl2 如图1所示，经氮离子注入诱变的黑曲霉A3孢子存活率具有随注入剂量的增加而减少，到达一定剂量时又增大，然后再减小，再增大的趋势，在1.56×1015ions/s?cm2剂量下，孢子的存活率达到最大。 根据图2可以得出，玉米穗、麸皮、麦秸都可以作为一种易利用碳源，适量的添加有助于菌体的生长繁殖和产酶量的提高，相比之下，玉米穗的产酶活较高 木聚糖酶在工业生产中，需要消耗大量的碳源，成本高，而且还会造成一定程度的环境污染，因此本试验采用玉米穗作为碳源以促进该酶的商品化应用。 少量的麦麸能够加速黑曲霉产酶，很可能是因为其提供了黑曲霉生长的必需物，同时，低浓度的聚山梨醇酯80也有利于黑曲霉的生长，但浓度过高产酶量也会相应降低。 通过对出发菌株注入不同剂量的氮离子，低能氮离子束对菌体细胞均有一定程度的致死和损伤作用，细胞及其损伤DNA又在其修复系统的作用下得到不同程度的修复，从而导致黑曲霉孢子的存活率先下降，后上升