高中生物选修专题DNA和蛋白质技术.pptVIP

课题3 血红蛋白的提取和分离 实验操作 2.粗分离－－透析 ③过程： ①透析目的：除去样品中分子量较小的杂质 ②原理： 利用透析袋的半透性 某些杂质分子比血红蛋白分子小，可透过透析袋 课题3 血红蛋白的提取和分离 实验操作 3.纯化 1)凝胶色谱柱的制作： ①玻璃管 ②底塞的制作 ③顶塞的制作 ④组装 ⑤安装其他附属结构 原理 用凝胶色谱法将分子量较大的杂质蛋白质除去 步骤 课题3 血红蛋白的提取和分离 实验操作 3.纯化 步骤 2)凝胶色谱柱的装填 ①凝胶的选择 ②凝胶的前处理 ③凝胶色谱柱的装填方法 注意:a凝胶装填时尽量紧密,以降低凝胶颗粒之间的空隙 b装填凝胶柱时不得有气泡存在 课题3 血红蛋白的提取和分离 实验操作 3.纯化 步骤 2)凝胶色谱柱的装填 ①凝胶的选择 ②凝胶的前处理 ③凝胶色谱柱的装填方法 注意:a凝胶装填时尽量紧密,以降低凝胶颗粒之间的空隙 b装填凝胶柱时不得有气泡存在 ④洗涤平衡 注意：a液面不要低于凝胶表面， b不能发生洗脱液流干，露出凝胶颗粒的现象 3.样品的加入和洗脱 1.调液面 2.加样 3.再调液面 4.洗脱 5.收集 缓冲液 凝胶 课题3 血红蛋白的提取和分离 实验操作 3.纯化 步骤 3)样品加入与洗脱 注意：a不要触及并破坏凝胶面。b贴壁加样。