脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶1在氧化应激介导大鼠肺微血管内皮细胞损伤中的调控作用-期刊.pdfVIP

October2016，Vo1．9No．5 ·309 · 生 重 医堂 壶(电 )2Q!生 !Q 箍 鲞簋 』虫 丛 (E!ruicEdit1in)，— — · 论 著 · 脱嘌呤 ／脱嘧啶核酸 内切酶 1在氧化应激 介导大 鼠肺微血管内皮细胞损伤中的 调控作用 翁杰 侯金珍 汤鲁明 谢慧 陈大庆 孙来芳 应斌宇 龚裕强 【摘要】 目的 探讨脱嘌呤 ／脱嘧啶核酸内切酶 1(APE1)在过氧化氢 (H02)介导的大 鼠肺 微血管内皮细胞 (PMVECs)氧化应激中的调控作用。 方法 分离培养大鼠PMVECs并分成4 组：对照组 (未加 H202)及各剂量H20：组 (终浓度分别为 50、100、200Ixmol／L的H02)。在H：0刺 激细胞 24h后检测细胞增殖活性、细胞内活性氧水平及APE1蛋白表达，同时检测 100Ixmol／ml 的HO刺激细胞 24、48、72h后APE1蛋白表达并比较。另外利用慢病毒载体转染构建APE1过 表达PMVECs，将其分成对照组 (未加 H202)，H202组 (终浓度为 100I~mol／L的H02)，HO+空载 体转染组 (100 mol／L的H20：刺激慢病毒空载体转染的细胞)及 H：0+APE1转染组 (终浓度为 100tzmol／L的H202刺激APE1过表达细胞)，并在24h检测细胞活性氧水平及细胞增值情况。 结果 不同剂量组H20：刺激细胞 24h后，四组间细胞增殖活性、活性氧的水平和APE1蛋白表 达相对值差异均有统计学意义 =80．238、445．608、547．566，P均 0．001)。在 100I~mol／L的 H：0：刺激细胞 0、24、48和 72h后，APE1蛋 白表达相对值的比较有统计学意义 =422．324，P 0．001)，且随时问增加APE1表达也逐渐下降 『(0．781±0．043)、(0．611±0．026)、(0．407±0．014)、 (0．272±0．013)，P均0．o51。在转染慢病毒载体后，H2()组活性氧水平明显高于对照组 『(86．4± 1．2)vs．(56．4±0．9)，P0．o51；而HO+APE1转染组细胞活性氧水平较 H：0 组显著下降 『(66．8± 1．0)VS．(86．4±1．2)，P0．o51，细胞增殖活性 明显增加 『(0．209±0．001)VS．(0．153±0．001)，P 0．o51。 结论 H20刺激可导致APE1蛋白表达下降，而上调APE1表达可增加细胞增殖活性，并 抑制活性氧的产生。因此，APE1可能具有减轻 HO 介导的大 鼠PMVECs氧化应激反应的作用。 【关键词】 过氧化氢；氧化性应激；活性氧类；脱嘌呤 ／脱嘧啶核酸内切酶 1；肺微血管内 皮细胞 M odulation ofapurinic／apyrimidinic endonuclease-1on oxidativestressinduced pulmonary microvascularendothelialcellsinjuryin rats WengJ ，HouJinzhen1,TangLumingl，Xie Hui1,ChenDaqin~,SunLaifnagl,YingBinyu~GongYuqinag2． 1DepartmnetofEmergency, 2DepartmentofIntensiveMedicine，SecondAffiliatedHospitalof WenzhouMedicalUniversity, Wenzhou32500~ China Corresponding author：Gong Yuqinag,Email：gyq12120@163．com [Abstract] Objecfive Toinvestigatethemodulationofapurinic／apyrimidinicendonuclease一1 (APE1)onoxidativestressreactionofpulmonarymicrovascularendothelialcells (PMVECs)in