E2F-1基因反转录病毒载体的构建及其对人胃癌细胞MGC-803增殖的影响.pdfVIP

肿瘤 2010年5月第30卷第 5期 TumorVo1．30，No．5，May，2010 ·381 · DOI：10．3781／j．issn．1000-7431．2010．05．0O4 BasicResearch·基础研究 E2F-1基 因反转录病毒载体 的构建及其对人 胃癌细胞 MGC．803增殖 的 影响 钱 倩 ，李 雷 ，王晓通 ，苑汐子 ，谢玉波 ，肖 强 (广西医科大学第一附属医院1．胃肠腺体外科；2．麻醉科，南宁 530021) [摘要] 目的：通过构建人同源基因E2F一1反转录病毒表达载体，观察E2F一1过表达对 胃癌细胞MGC一803增殖的影响。方 法：应用基因重组技术将E2F一1基 因克隆到反转录病毒载体 pLXSN中，并将经酶切和 RT—PCR检测正确的重组载体转染 PA317包装细胞，收集病毒上清液感染 胃癌细胞MGC一803。应用 RT—PCR和Western印迹法检测MGC一803／pLXSN—E2F一1细胞 中E2F一1mRNA和蛋白的表达情况。应用克隆形成实验和MTY法检测细胞的增殖情况。结果 ：经酶切和RT—PCR检测结果 显示，成功构建 E2F一1反转录病毒表达