大豆不同生长时期基因组DNA提取方法的优化.pdfVIP

中圊患亏c童握 2013，29(36)：319—325 ChineseAgriculturalScienceBulletin 大豆不同生长时期基因组DNA提取方法的优化 王月月，范 龙，张 洁，王冬梅 (河北农业大学生命科学学院，河北保定071000) 摘 要：以探索大豆嫩叶期基因组提取方法为基础，探索从富含酚类、多糖等代谢物质的大豆开花期叶片 中获得高质量DNA的提取方法。采用不同的方法提取5种大豆品种在不同生长时期的叶片基因组，并 通过对提取的DNA的含量测定、琼脂糖凝胶电泳分析和内参基因的PCR扩增，对不同方法所提取的 DNA质量进行综合评价。在嫩叶期，利用前人改进的CTAB法能够分离出纯度高、质量好的DNA，而在 开花期，采用本试验新改良的CTAB法可以更有效去除多糖、酚类等物质得到完整性和纯度较好的大豆 基因组。前人改进的CTAB法和本试验摸索的新改 良CTAB法分别适用于嫩叶期、开花期大豆基因组 DNA提取，为大豆的分子生物学研究奠定了基础。 关键字 ：大豆；不 同生长时期；DNA提取方法；PCR；