钩端螺旋体外膜蛋白LipL32单克隆抗体的制备及鉴定.pdfVIP

． 26． 微生物与感染 JournalofMicrobesandInfections，March25，2010，5(1)：2630 http：∥jmi．fudan．edu．en · 论 著 · 钩端螺旋体外膜蛋白LipL32单克隆抗体的制备及鉴定 王亚琳 ，张湘燕 ，王压娣 ，车小燕 ，郭晓奎 1．上海交通大学医学院基础医学院病原生物学教研室，上海 200025；2．南方医科大学珠江医院临床医学院 基础研究所，广州 510282 摘 要：LipL32是钩端螺旋体外膜中含量最丰富的蛋白，有很好的免疫原性，且在致病性钩端螺旋体中高度 保守。在非变性条件下纯化 LipL32重组蛋白，与佐剂混匀后免疫BALB／e小鼠，取脾脏细胞与 NS-1骨髓瘤 细胞融合，然后用间接酶联免疫吸附试验 (EIISA)和有限稀释法分别进行筛选和细胞克隆，获得29株能稳定 分泌抗LipL32单克隆抗体的杂交瘤细胞株 ，它们能识别8个LipL32抗原表位。用这些细胞株制备腹水型抗 体，并对特性进行鉴定。用生物素标记这些抗体后两两配对，采用双抗夹心 ELISA检测提取 自15株致病性 钩端螺旋体及其他致