分光光度法102.ppt

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分光光度法102

* * * * * * 由于人类的活动,一些含氮、磷的营养物质,通过河口、湖泊、海湾,排放到海里,导致海水富营养化,海藻、浮游生物大量繁殖,消耗大量的溶解氧,导致水质恶化。 * * * * * * 复杂生物介质中样品的测定。例如,生物样品浊度较大,在较大的波长范围里都有吸收或散射,可以通过双波长加以扣除。 * * * * * * * * * * 分析化学 2008-2009学年 * 示差吸光光度法 目的:提高光度分析的准确度和精密度 解决高(低)浓度组分(i.e. A在0.2~0.8以外)问题 分类:高吸光度差示法、低吸光度差示法、 精密示差吸光度法 特点: 以标准溶液作空白 准确度:读数标尺扩展, 相对误差减少, cs愈接近cx, 准确度提高愈显著 分析化学 2008-2009学年 * 示差法提高准确度的实质 常规法 Tx T 0 5 10 50 100 落在测量误差较 大 的范围 示差法 T 0 5 10 50 100 Tr Ts Ts 落在测量误差较 小 的范围 结论:示差法通过提高测量的准确度提高了方法的准确度 分析化学 2008-2009学年 * 2.双波长分光光度法(两组分共存) ?2 ?1 A ? X Y ∵ ∴ Y 的存在不干扰 X 的测定 光源 单色器 单色器 检测器 切光器 狭缝 吸收池 问题 分析化学 2008-2009学年 * 问题 1. 双波长法与常规参比法比较,有什么特点? 2.如何借助于双波长法消除干扰? 参比波长和测量波长的选择: 待测组分在两波长处的吸光度差△A要足够大, 干扰组分在两波长处的吸光度相等 ?1 A ? X Y ?2 分析化学 2008-2009学年 * 10.6吸光光度法的应用 HR = H+ + R- ?HR 用光度法可以测定其离解常数 ?R A ? HR R ?HR ?R 用吸光值表征 ,相对于pH作图,可求得pKa 或 10.6.1.弱酸弱碱离解常数的测定 分析化学 2008-2009学年 * 复习分布系数 一元弱酸: 分析化学 2008-2009学年 * 醋酸的分布分数图分析 作图,即分布系数图 ?i pH 0.5 1.0 pKa HAc Ac- 作图,可得分布分数图 Ac-为主要存在形式 HAc为主要存在形式 分析化学 2008-2009学年 * 配制一系列不同pH, 浓度 c 相同的溶液 半中和法 pH 在 ?HR 测吸光度 A pH ?R A ? HR R ?HR 高酸度 [HR] ≈ c 强碱性 [R-] ≈ c pH = pKa [HR] / [R-] = 1 , [HR] =[R-] =c/2 A2 A1 测得A2 测得A1 A′对应的pH 即为 pKa A′ pKa 分析化学 2008-2009学年 * 在上述实验的基础上作数据处理 截距法 对特定 pH b = 1 cm 高酸度 [HR] ≈ c 强碱性 [R-] ≈ c 代入得 整理得 作图,直线截距为 pKa pH 分析化学 2008-2009学年 * 10.6.2 络合物的组成及稳定常数的测定 1.摩尔比法测络合比(饱和法) M + n

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