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MALDI制样方法及离子化机理 1:基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 MALDI仪器原理示意图 3.1:MALDI制样方法的研究现状 3.1.1:普通固相制样方法 1：干点(Dried-droplet) 配制法 2：薄层法(Thin layer method) 3：厚层法 (thick layer method) 4：三明治法 5：喷雾沉积法 3.2特殊的制样方法 3.1.2:DIOS法 3.1.3:非溶剂法 3.1.4:液相制样方法 4：MALDI离子化机理 MALDI的基本原理可简单描述为被测样品以一定的比例（通常情况下，基质与待测物的物质的量的比例在100:1至10000:1内）与一小分子基质化合物相混合，使得所待测样品被大量的基质所分散，采用某一特定波长的激光照射制备好的样品。虽然待测物对激光有很弱的吸收，但是基质对激光有较强的吸收，当时一脉冲激光照射到基质上，基质吸收能量而激发，被激发基质分子发生爆炸，并同时把被基质包裹的待测物分子卷入气相形成卷流并在气相中使之离子化。同时，基质在待测物离子化过程中还作为质子化试剂或去质子化试剂。可见, 基质在待测物的解吸和离子化的过程中起者重要的作用。基质的加入使得除待测物－基质以外的分子之间的相互作用减小，因此降低了样品的解吸能,解决了难挥发性物质的气化问题[27]，对于MALDI而言，基质对最终结果有显著影响：甚至溶剂的选择、结晶速度的快慢、浓度的大小，基质与样品的比例、制样方法对最终结果都有显著的影响。基质在MALIDI- MS方法中的作用主要包括两个方面[25、28、29、31]：（1）从激光光源吸收能量以防止分子分解；（2）使被测分子离子形成单分子状态，以防它们形成多聚体;(3):合适的基质会通过其分子的光激发或光离子化作用而把质子转移给待测物，从而促使待测物分子离子的形成。第一条要求基质对激光光源有很强的吸收，因而到目前为止，文献报道的基质化合物大多数为含苯环的有机化合物；第二条作用要求基质 能量集中 MM?M*M*?M+M+·+e-.（或者其它基质离子） M*M*+A?MM+A+.+e-. (或者其它样品离子) ESPT M+?M* M*+A?(M-H)?+AH+ M++M?(M?H)?+MH? 分解反应 2M?(MM)*?(M?H)?+AH+ 或2M?(MM)*?MH+ 卷流内的反应 M+?+M?MH++(M-H)? M +e??(M-H)?+H+? MH+?+A?M+AH+? (M-H)?+A?M+(A-H)? M: 基质 A: 样品 M+M?MH++(M-H)? M+M2?MH++(M2-H)? F+M2?FH++(M2-H)? M: matrix M2: 基质二聚体 F: 碎片 电子迁移 M+?+A?M+A+? 4.4：其它 1:激光解吸电离 * * 与被测分子有很好的相容性，同时不能有分子的相互作用。常用的基质化合物有：α-氰基肉桂酸 （α-Cyano-4-hydroxycinnmaic acid ，CHCA）、 2、5－二羟基苯甲酸（2，5－dihydroxy benzonic acid， DHB）、2－对羟苯偶氮基苯甲酸（2-(4-hydroxphenyl)azo）-benzonic acid，HABA)、 t-3吲哚基丙烯酸 (t-3-indoleacrylinic-acid，IAA)、2，4，6－三羟基苯乙酮(2,4,6-trihydroxyacetpophenone，HPA)及芥子酸（sinapinic acid, SA）、No-Rharmane等。事实上对于不同种类的化合物应选用不同的基质。 A+M2?AH++(M2-H)? 3::电荷补偿 2:抑制效应