实验5 葡萄糖注射液含量测定.doc

实验五 葡萄糖注射液的含量测定（旋光法） 一、目的要求 1.掌握旋光法测定葡萄糖注射液含量的原理、方法及计算。 2.学会使用自动旋光仪。 二、仪器与试剂 仪器：自动旋光仪 试剂：葡萄糖注射液 三、方法原理 葡萄糖分子结构中有多个不对称碳原子，具有旋光性，为右旋体。一定条件下的旋光度是旋光性物质的特性常数，测定葡萄糖的比旋度，可以鉴别药物，也可以反映药物的纯杂程度。旋光度（α）与溶液的浓度（c）和偏振光透过溶液的厚度（L）成正比。当偏振光通过厚1dm且每1ml中含有旋光性物质1g的溶液，使用光线波长为钠光D线（589.3nm），测定温度为t℃时，测得的旋光度称为该物质的比旋度，以[α] =α/Lc。 无水葡萄糖的比旋度为+52.75，按下式计算无水葡萄糖的浓度：无水葡萄糖浓度（c）=100 α/[α] L,如果换算成一水葡萄糖浓度 （cˊ）时，则应为： cˊ= c× =1.1×c 所以，测定葡萄糖溶液的旋光度可以求得其含量。 四、旋光仪的使用方法 （1）将仪器电源插头插入220V交流电源，并将接地脚可靠接地。 （2）打开电源开关，这时钠光灯应启亮，需经5min钠光灯预热，使之发光稳定。 （3）打开电源开关（若光源开关打开后，钠光灯熄灭，则再将光源开关上下重复打开1到2次，使钠光灯在直流下点亮，为正常）。 （4）打开测量开关，这时数码管应有数字显示。 （5）将装有蒸馏水或其他空白溶剂的试管放入样品室，盖上箱盖，待示数稳定后，按清零按钮。试管中若有气泡，应先让气泡浮在凸颈处。通光面两端的雾状水滴，应用软布揩干。试管螺帽不宜旋得过紧，以免产生应为，影响读数。试管安放时应注意标记的位置和方向。 （6）取出试管，将待测样品注入试管，按相同的位置和方向放入样品室内，盖好箱盖。仪器数显窗将显示出该样品的旋光度。 （7）逐次按下复测按钮，重复读几次数，取平均值作为样品的测定结果。 （8）如样品超过测量范围，仪器在±45处来回振荡。此时，取出试管，打开箱盖按箱内回零按钮，仪器即自动转回零位。 （9）仪器使用完毕后，应依次关闭测量、光源、电源开关。 （10）钠灯在直流供电系统出现故障不能使用时，仪器也可在钠灯交流供电的情况下测试，但仪器的性能可能略有降低。 （11）当放入小角度样品（小于0.5°）时，示数可能变化，这时只要按复测按钮，就会出现新的数字。 五、操作步骤 1.调整零点 将旋光管用蒸馏水冲洗数次，缓缓注满蒸馏水（注意勿使发生气泡），小心盖上玻璃片、橡胶垫和螺帽，旋紧旋光管两端螺帽时，不应用力过大以免产生应力，造成误差，然后以软布或擦镜纸揩干、擦净，认定方向将旋光管置于旋光计内，调整零点。 2.测定 将旋光管用供试液冲洗数次，按上述同样方式装入供试液并按同一方向置于旋光计内， 同法读取旋光度3次，取其平均值。 六、实验结果 葡萄糖 1 2 3 α α平均值 1.数据记录 L= 2.结果计算 六、注意事项 1.钠光灯启辉后至少30min后发光才能稳定，测定或读数时应在发光稳定后进行。 2.测定时应调节温度至20℃±0.5℃。 3.供试液应不显浑浊或含有混悬的小粒，否则应预先过滤并弃去初滤液。 4.测定结束后须将测定管洗净晾干，不许将盛有供试品的测试管长时间置于仪器样品室内；仪器不使用时样品室可放硅胶吸潮。