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北五味子提取多糖技术研究 　　[摘 要]目的建立提取和测定北五味子中多糖含量的方法。方法采用比色法测定北五味子中多糖含量。结果测得北五味子中多糖含量为6.57%，平均回收率为99.78%，RSD=1.54%。结论 该方法简便、精密度及重现性均较好，结果令人满意。 [关键词]北五味子 多糖 中图分类号：S1 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2014）13-0344-01 北五味子Schisandra chinensis（Turcz）Baill Fruit是木兰科植物五味子的干燥成熟果实，是著名的滋补性中药，因其果实甘、酸、辛、苦、咸五味俱全，故名五味子，具有敛肺、滋肾、生津、收汗、涩精之功效。 现代 药理研究证实五味子对中枢神经系统、呼吸系统均有兴奋作用，亦能促进肝糖原异生，加快肝糖原分解，在 治疗 神经衰弱、肝炎等的药物中应用十分广泛。五味子有南北之分，据《本草纲目》记载“五味子南产者红，北产者黑，入滋补药，必用北者为良”，北五味子的化学成分主要为五味子木脂素、挥发油、五味子醇、多糖等。近年来对多糖提取工艺的研究方法很多，如热水浸提法、稀碱液浸提法、稀酸液浸提法。但多糖是由单糖基通过糖苷键连接而成的化合物，在稀酸、稀碱条件下，易使多糖发生糖苷键的断裂，部分多糖发生水解而使多糖的提取率减少，因此本文采用热水浸提法，用苯酚-硫酸法测定北五味子多糖的含量，得到满意的结果。 1 仪器与药品 北五味子购于张家口市药材公司经鉴定为北五味子，其它试剂均为国产分析纯；UV752分光光度计（上海第三仪器厂）；GOA型电热真空干燥箱（天津东郊机械加工厂）；RE52A型旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）。 2 方法与结果 2.1 葡萄糖储备液的配制精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖100 mg，用蒸馏水溶解并定容到100 ml。 2.2 苯酚溶液的配制取苯酚100 g，加铝片0.1 g和NaHCO3 0.05 g，蒸馏，收集182℃馏份，称取7.5 g，加水150 ml溶解，置棕色瓶内放冰箱备用。 2.3 测定条件选择 2.3.1 反应温度选择精密吸取葡萄糖储备液1.0 ml于100 ml容量瓶中，用水稀释至刻度，作为对照品溶液。分别吸取葡萄糖对照品液1.0 ml于两个具塞试管中，各加苯酚液1.0 ml，并分别迅速滴加浓硫酸5.0 ml。另取两份1.0 ml水同上操作，为空白液。一份于水浴中煮沸15 min，另一份于40℃水浴中恒温30 min取出，冷却至室温，15 min后于490 nm处测其吸光度值，分别为0.112和0.126。因此，本实验采用40℃恒温30 min的方法。 2.3.2 苯酚及硫酸用量选择吸取葡萄糖对照品液1.0 ml5份，分别加入苯酚液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 ml，分别加水至2.0 ml，再各滴加浓硫酸5.0 ml，40℃恒温30 min后，测其吸光度值，分别为0.095，0.112，0.125，0.127，0.126，可见加入苯酚液0.6 ml以上时，反应都能完成；另取葡萄糖对照品液1.0 ml5份，分别加苯酚液1.0 ml，再分别滴加浓硫酸2.0，3.0，4.0，5.0，6.0 ml，并均用水稀释至8.0 ml，加入硫酸体积占总体积的62.5%以上时的结果较满意。 2.3.3 反应时间选择及稳定性取葡萄糖对照品溶液1.0 ml3份，各加苯酚液1.0 ml，浓硫酸5.0 ml，于40℃分别恒温20，30，40 min。测得吸光度值分别为0.16，0.125，0.126，可见加热30 min即可使反应完全。另测反应完成后样品在不同时间内的吸光度值，结果3 h内稳定。 2.4 标准曲线绘制精密量取葡萄糖标准溶液0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6 ml置具塞试管中，分别加蒸馏水使成1.0 ml，再分别加入苯酚溶液1.0 ml，摇匀，然后加浓硫酸5.0 ml，充分摇匀，于40℃水浴中恒温30 min，取出，冷却至室温，另以蒸馏水同上操作为空白对照，在490 nm处测定吸光度，绘制标准曲线，建立回归方程：A=0.067 81C+0.006 204 71，r=0.999 8。 2.5 精密度实验精密吸取对照品溶液1.0 ml，6份，同2.4项下操作，结果显示吸光度的RSD=1.45%。 2.6 多糖的提取流程北五味子粉碎后，称取500 g，用清水洗净，加水4 500 ml，微沸煎煮1 h。过滤，滤渣加水2 000 ml，煎煮1 h，过滤，合并提取液，加热浓缩至300 ml。加入乙醇使乙醇含量为80%放置12 h，抽滤，沉淀依次用无水乙醇、丙酮反复洗涤，得到棕色粗多糖。将粗多糖溶于水，用seveg法除去蛋白