天麻头风灵胶囊质量标准研究.doc

天麻头风灵胶囊质量标准研究 　　[摘 要]采用高效液相色谱法测定天麻头风灵胶囊中天麻素的含量。 [关键词]天麻头风灵胶囊；质量标准 中图分类号：S012 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2014）13-0351-01 天麻头风灵胶囊由天麻、川芎、玄参、当归、地黄、槲寄生、野菊花等10味中药组成，具有平肝潜阳、清眩止痛、补益肝肾、息风止痉、镇静、镇痛和抗炎作用。为了有效控制本品质量， 我们对天麻等4味中药进行了薄层鉴别，并采用高效液相色谱法对方中君药天麻的有效成分天麻素进行了含量测定。对天麻素的测定， 文献报道的方法有二阶导数光谱法、三阶导数分光光度法、双波长薄层扫描法、高效液相色谱法等。我们选择天麻素为指标性成分，建立了测定天麻头风灵胶囊中天麻素含量的高效液相色谱法，取得了较好的结果[1][2]。 一、 仪器与试药 Waters 高效液相色谱仪系统515泵；717自动进样器；2487紫外检测器；Millennium 32色谱管理系统。Sartorius BP211D型 电子 天平；瑞士CAMAG Ⅲ型薄层色谱系统。天麻素对照品（ 中国 药品生物制品检定所，批号110807- 200205）；天麻头风灵胶囊（自制，批号040613，040614， 040615）。甲醇（色谱纯），磷酸（分析纯），重蒸馏水（自制）。 二、方法与结果 1、薄层色谱鉴别 1）天麻 取本品10片，研细，加水饱和的正丁醇50 mL，浸泡一夜，超声处理30 min，滤过，滤液用水30 mL分3次振摇提取，合并水层，浓缩至5 mL。通过D-101大孔树脂柱（内径1.5 cm，长12 cm），以水15 mL洗脱，弃去水液，再用10%乙醇40 mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。取天麻素对照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。取天麻对照药材0.5 g，加甲醇5 mL，超声处理30 min，滤过，滤液作为对照药材溶液。阴性制剂溶液的制备方法同供试品溶液的制备方法。 照薄层色谱法[2010年版《中国药典》（一部）附录ⅥB][5]试验，分别吸取阴性制剂溶液、对照品溶液、对照药材溶液及供试品溶液各10 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-冰醋酸（12∶4∶0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钼酸-乙醇溶液，在105 ℃加热至斑点显色清晰，日光下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的棕褐色斑点。阴性制剂无此斑点[3]。 2）当归、川芎 取本品25片，研细，加乙醚20 mL浸泡1 h，超声处理30 min，滤过，滤液挥干，残渣加氯仿1 mL使溶解，作为供试品溶液。取当归、川芎对照药材各0.5 g，同法制成对照药材溶液。阴性制剂（缺当归、川芎）溶液的制备方法同供试品溶液制备方法。 照薄层色谱法[2010年版《中国药典》（一部）附录ⅥB] 试验，吸取缺当归、川芎的阴性制剂、供试品溶液20 μL、当归、川芎对照药材溶液各1 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯（9∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。同缺当归川芎的阴性制剂无此斑点。 3）野菊花 取本品制剂10片，研细，加甲醇15 mL，超声处理30 min，取上清液，作为供试品溶液。取野菊花对照药材0.3 g，同法制成对照药材溶液。阴性制剂溶液的制备方法同供试品溶液的制备方法。 照薄层色谱法[2010年版《中国药典》（一部）附录ⅥB]试验，吸取阴性制剂溶液、供试品溶液2 μL及对照药材溶液1 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-氯仿-甲醇-水（15∶15∶6∶4∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性制剂无此斑点。 2、天麻素的含量测定 1）色谱条件和系统适应性试验 色谱柱：Kromasil C18反相柱（250 mm×4.6 mm，ID）；流动相：甲醇-0.05%磷酸水（2.5∶97.5）；柱温：30 ℃；流速：1 mL/min；测定波长：220 nm；进样量：20 μL。在上述色谱条件下测定，天麻素达到基线分离，理论塔板数按天麻素峰 计算 大于5 000[4]。 2）对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液的制备 精密称取在80 ℃减压干燥1 h的天麻素对照品适量，加甲醇制成每1 mL含25 μg的溶液，即得对照品溶液。取本品20片，研细，取粉末0.5