异戊二烯焦磷酸异构酶的表达及其催化功能验证-武汉科技大学学报.PDFVIP

第 卷第 期 武 汉 科 技 大 学 学 报 ， ３６ ３ 犞狅犾．３６犖狅．３ 年 月 ２０１３ ６ 犑狅狌狉狀犪犾狅犳犠狌犺犪狀犝狀犻狏犲狉狊犻狋狅犳犛犮犻犲狀犮犲犪狀犱犜犲犮犺狀狅犾狅 犑狌狀．２０１３ 狔 犵狔  异戊二烯焦磷酸异构酶的表达及其催化功能验证 ， ， １２ １ ３ ２ １２ ２ 刘 敏 ，刘建忠 ，冯红茹 ，杨建明 ，苏思正 ，曹玉锦 　 （ 武汉科技大学化学工程与技术学院，湖北 武汉， ； 中国科学院青岛生物能源与过程研究所， １． ４３００８１２． 山东 青岛， ； 沈阳农业大学生物科学与技术学院，辽宁 沈阳， ） ２６６１０１３． １１０８６６ 摘要：以大肠杆菌和枯草芽孢杆菌基因组ＤＮＡ为模板，采用聚合酶链式反应扩增法分别克隆来自大肠杆菌 和枯草芽孢杆菌的异戊二烯焦磷酸异构酶基因，将其在大肠杆菌 （ ）中异源过量表达，验证其催化 ＢＬ２１ ＤＥ３ 功能，并考察其对 胡萝 卜素和异戊二烯合成的影响。结果表明，来自枯草芽孢杆菌的异戊二烯焦磷酸异构  β 酶对 胡萝 卜素和异戊二烯的产量有明显的促进作用，该酶的异源表达使 胡萝 卜素的产量由 ／   １．０８ｍ Ｌ β β ｇ 提高到 ／ ，异戊二烯的产量由 ／ 提高到 ／ 。 ３．２５ｍ Ｌ ０．８０ｍ Ｌ ２．９６ｍ Ｌ ｇ ｇ ｇ 关键词：异戊二烯焦磷酸异构酶；大肠杆菌；异戊二烯；胡萝 卜素  β 中图分类号： 文献标志码： 文章编号： （ ） Ｑ９３３３ Ａ １６７４３６４４２０１３０３０２１４０５ 　　 　　 异戊二烯除了合成橡胶的主要单体外，在医 基因，并将其异构酶基因在大肠杆菌 （ ） ＢＬ２１ＤＥ３ 　　 ［］ １ 药、香料以及工业黏结剂等领域 也应用十分广 中异源过量表达，验证其催化功能，考察其对 胡