引物与DNA模板结合-angels-bluecom.PPTVIP

总结：PCR技术所需的条件： 1.DNA模板 2.分别与两条模板链相结合的两种引物 3.四种脱氧核苷酸 4.耐热的DNA聚合酶 5.一定的缓冲溶液（调节PH） 6.通过控制温度使DNA复制在体外进行（ PCR仪 ） PCR的反应过程 PCR一般经历三十多次循环，每次循环可以分为三个基本步骤──变性、复性和延伸。 在循环之前，常要进行一次预变性，以便增加大分子模板DNA彻底变性的概率。 从第二轮循环开始，上一次循环的产物也可以作为模板参与反应，并且由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链会与引物Ⅱ结合，进行DNA的延伸，这样，DNA聚合酶只能特异性地复制处于两个引物之间的DNA序列，使这段固定长度的序列呈指数扩增。 * 一、PCR的原理（1、体内DNA的结构 ） T 1/ 2/ 3/ 4/ 5/ 1/ 2/ 3/ 4/ 5/ A DNA分子的-OH端为3/ ; 磷酸基团的末端为5/ 。 DNA的复制 ATCGCGATAGCGTAGCTGCGACCTAGC 5’ 3’ TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG 3’ 5’ ATCGCGATAGCGTAGCTGCGACCTAGC 5’ 3’ TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG 3’ 5’ GGAUCG 5‘ AUCGCG 5‘ 引物1 引物2 ATCGCGATAGCGTAGCTGCGACCTAGC 5’ 3’ TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG 3’ 5’ GGAUCG 5‘ AUCGCG 5‘ TAGCGCTATCGCATCGACGCT 3’ ATAGCGTAGCTGCGACCTACG 3’ DNA 聚合酶 DNA 聚合酶 a、DNA变性（90℃以上）： 双链DNA模板在热作用下，_____断裂，形成___________ 氢键 单链DNA 引物 Ⅰ 引物 Ⅱ 5’ 3’ 5’ 5’ 3’ 5’ 3’ 3’ b、复性(退火)（50℃左右）： 系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部________。 双链 引物Ⅰ 引物Ⅱ 5’ 3’ 5’ 5’ 3’ 5’ 3’ 3’ Taq DNA 聚合酶 c、延伸（72℃左右）： 在TaqDNA聚合酶的作用下，从引物的5′端→3′端延伸，合成与模板互补的________。 DNA链 第1个 PCR 循环后 ：得到两个拷贝的DNＡ序列 *