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砀山酥梨多酚氧化酶基因PbPPO的原核表达及优化-亚热带植物科学
2017,46(3): 209 ～214.
Subtropical Plant Science
砀山酥梨多酚氧化酶基因(PbPPO) 的
原核表达及优化研究
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常 艳 ，刘晓峰 ，金 青 ，蔡永萍 ，聂 凡 ，林 毅
(1.安徽农业大学生命科学学院，安徽 合肥 230036 ；2.安徽省农业科学院园艺研究所，安徽 合肥 230031)
摘 要：从砀山酥梨 Pyrus bretschneideri ‘Dangshan Su’果实中克隆得到一条多酚氧化酶基因(PbPPO)的全长
cDNA 序列(GenBank 登录号：JF809859) 。通过生物信息学分析表明，PbPPO 基因 CDS 区全长 1782 bp，编码
593 个氨基酸，氨基酸序列由 N 端叶绿体转运肽、Cu 结合区与 C 端疏水区三部分组成。为进一步研究 PbPPO
基因的功能，成功构建其原核表达载体 pET-28a-PbPPO ，并在大肠杆菌 Rosetta 菌株中成功诱导表达，经优化
-1
后显示，在 28 ℃、1.0 mmol·L IPTG 诱导 5 h 的条件下，融合蛋白表达量最高。
关键词：厚砀山酥梨；木质素；石细胞；多酚氧化酶；原核表达
Doi: 10.3969/j.issn.1009-7791.2017.03.002
中图分类号：S661.2 文献标识码：A 文章编号：1009-7791(2017)03-0209-06
Prokaryotic Expression and Its Optimization of Polyphenol Oxidase Gene
(PbPPO) in Pyrus bretschneideri ‘Dangshan Su’
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CHANG Yan , LIU Xiao-feng , JIN Qing , CAI Yong-ping , NIE Fan , LIN Yi
(1.School of Life Sciences, Anhui Agricultural University, Hefei 230036, Anhui China; 2.Horticultural Institute, Anhui Academy
of Agricultural Sciences, Hefei 230031, Anhui China)
Abstract: This study cloned the full-length cDNA sequence of a polyphenol oxidase gene (PbPPO)
from Dangshan Su pear. The bioinformatics analysis showed that the full-length of PbPPO gene was
1782 bp, encoding 593 amino acids. The amino acid sequence consisted of three parts: N terminal
chloroplast transport peptide, Cu binding region and C-terminal hydrophobic region. In order to
further study the function of PbPPO gene, the prokaryoti
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