综合性试验课程指导书生物显微技术大试验陈超石洪凌编写适用.DOC

综合性实验课程指导书 《生物显微技术大实验》 陈超、石洪凌 编 写 适用专业： 生物科学 生物技术 唐山师范学院生命科学系 2007年3月 实验学时： 36 学时 实验类型：综合性 每组人数： 4 人／组 一、实验目的 通过本实验的学习，使学生了解传统显微摄影的原理和方法、暗室技术，掌握采用徒手切片与整体制片法制作永久切片的技术；掌握石蜡切片制作技术及各步骤相关的知识点，掌握数码显微摄影的技术，学会植物内部结构的比较研究方法。显微摄影?? 传统的显微摄影一般使用传统的相机，将镜头去除，装在显微镜上，拍摄显微镜下看到的切片；对焦、光圈、曝光全在显微镜上操作完成，除了连续照明外，甚至装有闪光灯和色温表，自动曝光系统既可点测光也可中心重点测光，曝光补偿、倒记数显示等等，一应俱全。 传统的显微摄影有着和传统相机一样的缺点：拍摄的照片，不能立拍即现，照片必须要经过冲洗，在数字化成电子文挡的时候，细节有损失等等。 数码显微摄影在装置上，一般使用数码相机通过各种接口和显微镜的组合，然后数码相机和计算机相连；数码显微摄影的优点在于，可即时浏览拍摄，拍摄后的照片即时观看，减少废片率；另外拍摄后的照片即时传入到计算机的分析软件，即刻得出分析接结果，大大缩减了因冲洗照片而耽误大量时间，从而解决了实验的连续性的问题；再者，数码显微摄影拍摄的图片为数字化的文档，可即刻用于power point教学或日后的编辑出版工作。 安装切片刀，刀的斜度，非常重要，最好先切除的蜡块试刀，以确定刀的斜度，一经调度适合后，就不要随便变动，以免每次试刀的麻烦。修整蜡块，将刀片移近蜡块，使小蜡块的下边与刀锋平行，然后把它固定，再转下蜡块．呈矩形才行。只有平整的蜡块，才能切出平整的蜡带。最后根据需要，调整控制切片厚度的机制。调度后，把它固定下来。上述四步骤完成后，就可进行切片，材料切成薄片后，须将切片粘在玻璃片上，加热展开，这叫粘片。玻片烘干后，须将蜡脱去，才能染色，脱蜡用二甲苯，再经酒精入水中，而后染色，其顺序如下：二甲苯→1/2 二甲苯十1/2纯酒精→100%酒精→95％酒精→85％酒精→70％酒精→50％酒精→30％酒精→水→染色以上各级约需5～10分钟。YD-6L智能生物组织包埋机、SD-3滑行切片机、QPJ-1旋转切片机、KD-202C轮转式切片机、RM2015上海LEICA切片机、PHT-400病理样品快速超声处理仪、KD-H烘片机、MDJ-4自动磨刀机、XSZ-HS3摄影生物显微镜、XSZ-HS7摄影生物显微镜、DMB5-223I-5Motic数码显微镜、方正尊越系列A360电脑、SFC-18MOTIC生物显微镜 试剂：95%乙醇、100%酒精、二甲苯、加拿大树胶、石蜡、卡诺固定液、FAA固定液、中性树胶、2% 氨水、爱氏苏木精染液、10%番红水溶液、0.5%固绿、甘油、