胃蛋白酶亲和有机聚合物毛细管整体柱的制备及性能考察-色谱.PDF

２０１４年８月 Ｖｏｌ．３２ Ｎｏ．８ Ａｕｇｕｓｔ ２０１４ ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ７９１～７９７ 研究论文 ＤＯＩ：１０．３７２４／ ＳＰ．Ｊ．１１２３．２０１４．０４０４２ 胃蛋白酶亲和有机聚合物毛细管整体柱的制备及性能考察 池翠杰，　 王　 伟，　 季一兵∗ （中国药科大学理学院，江苏 南京 ２１０００９） 摘要：以热引发原位聚合方法制备了聚（甲基丙烯酸缩水甘油酯（ｇｌｙｃｉｄｙｌ ｍｅｔｈａｃｒｙｌａｔｅ，ＧＭＡ）⁃乙二醇二甲基丙烯 酸酯（ｅｔｈｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌ ｄｉｍｅｔｈａｃｒｙｌａｔｅ，ＥＤＭＡ））毛细管整体柱，对整体柱的性能进行了表征。 结果表明，柱内部结 构均匀、渗透性好；整体柱能够实现苯等中性小分子化合物的分离，具有反相色谱特征，重现性和稳定性良好。 利 用整体柱环氧基团的活性，采用间接法，以戊二醛为连接臂制备胃蛋白酶亲和手性整体柱。 在毛细管电色谱模式 下进行了柱分离性能研究，并对缓冲液ｐＨ值和运行电压等分离条件进行了考察。 结果表明，亲和整体柱对４种碱 性手性药物（奈福泮、氨氯地平、西酞普兰、扑尔敏）有拆分效果，奈福泮、氨氯地平、西酞普兰能达到基线分离。 本 文为蛋白质亲和毛细管电色谱整体柱的制备和应用提供了新的思路和方法。 关键词：毛细管电色谱；聚（甲基丙烯酸缩水甘油酯⁃乙二醇二甲基丙烯酸酯）整体柱；胃蛋白酶亲和手性整体柱；碱 性药物；手性分离 中图分类号：Ｏ６５８　 　 　 文献标识码：Ａ　 　 　 文章编号：１０００⁃８７１３（２０１４）０８⁃０７９１⁃０７ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｅｐｓｉｎ ａｆｆｉｎｉｔｙ ｏｒｇａｎｉｃ ｐｏｌｙｍｅｒ ｃａｐｉｌｌａｒｙ ｍｏｎｏｌｉｔｈｉｃ ｃｏｌｕｍｎ ＣＨＩ Ｃｕｉｊｉｅ，ＷＡＮＧ Ｗｅｉ，ＪＩ Ｙｉｂｉｎｇ∗ （Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ，ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ ２１０００９，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｍｏｎｏｌｉｔｈｉｃ ｃｏｌｕｍｎ ｉｎ ａｆｆｉｎｉｔｙ ｃａｐｉｌｌａｒｙ ｅｌｅｃｔｒｏｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ （ＣＥＣ） ｈａｓ ａｔｔｒａｃｔｅｄ ｃｏｎｓｉｄｅｒａｂｌｅ ａｔｔｅｎｔｉｏｎ ｏｖｅｒ ｔｈｅ ｐａｓｔ ｄｅｃａｄｅｓ ｂｅｃａｕｓｅ ｏｆ ｉｔｓ ｇｒｅａｔ ｅｎａｎｔｉ⁃ ｏｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｂｉｌｉｔｙ． Ａ ｐｏｒｏｕｓ ｐｏｌｙｍｅｔｈａｃｒｙｌａｔｅ ｅｓｔｅｒ⁃ｂａｓｅｄ ｃａｐｉｌｌａｒｙ ｍｏｎｏｌｉｔｈｉｃ ｃｏｌｕｍｎ ｐｏｌｙ （ｇｌｙｃｉｄｙｌ ｍｅｔｈａｃｒｙｌａｔｅ⁃ｃｏ⁃ｅｔｈｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌ ｄｉｍｅｔｈａｃｒｙｌａｔｅ） （ｐｏｌｙ（ＧＭＡ⁃ｃｏ⁃ＥＤＭＡ）） ｗａｓ ｐｒｅ⁃ ｐａｒｅｄ ｂｙ ｉｎ ｓｉｔｕ ｃｏ⁃ｐｏｌｙｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ．Ｔｈｅｐｒｏｃｅｓｓｗａｓｉｎｉｔｉａｔｅｄｔｈｅｒｍａｌｌｙ ｂｙ ａｚｏｂｉｓｉｓｏｂｕｔｙｒｏｎｉｔｒｉｌｅ （ＡＩＢＮ）． Ｔｈｅ ｐｏｌｙｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｍｉｘｔｕｒｅ ｃｏｎｔａｉｎｅｄ ＧＭＡ ａｓ ｔｈｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｍｏｎｏｍｅｒ ａｎｄ ＥＤＭＡ ａｓ ｔｈｅ ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｉｎｇ ａｇｅｎｔ ｗｉｔｈ １，４⁃ｂｕｔａｎｅｄｉｏｌ ａｎｄ １⁃ｐｒｏｐａｎｏｌ ａｓｔｈｅｂｉｎａｒｙ ｐｏｒｏｇｅｎ ｓｏｌｖｅｎｔ． Ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄｒｅａｃｔｉｏｎ ｃｏｎ