试验三PCR技术扩增DNA片段-西安医学院基础医学试验教学中心.PPTVIP

西安医学院生化教研室 1.学会用PCR技术从质粒DNA上扩增目的基因。 2.复习PCR技术基本原理及反应过程。 实验目的 PCR技术扩增DNA片段 “他是个很活跃的孩子，常把各种东西混到一起。3岁那年，他把鸡蛋打碎搅成油漆，然后将房子刷成了黄色。我经常发现他几瓶子几瓶子地收集昆虫和蛆。我想他简直疯了。他对一切都入迷。今天我才知道这是因为他的思维太活跃了。” K. Mullis ( 1944 — ) 实验原理 1998年钱嘉韵在台湾国立政治大学讲座 黄石公园热泉 5? Primer 1 5? Primer 2 Cycle 2 Cycle 1 5? 5? 5? 5? 5? 5? Template DNA 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 1.基本工作原理 Cycle 3 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 5? 25～30 次循环后，模板DNA的含量可以扩大100万倍以上。 1.基本工作原理 2. PCR体系基本组成成分 3. PCR的基本反应步骤 变性 95?C 延伸 72?C 退火 Tm-5?C 概念：PCR（polymerase chain reaction，聚合酶链式反应），是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。 原理：DNA复制。 条件：已知基因的核苷酸序列