重组DNA药物药学专业.PPTVIP

重组DNA药物Recombinant DNA Drugs 三峡大学医学院 盛 德 乔 shengdq@ctgu.edu.cn QQ:834309103 重组DNA药物：应用重组DNA技术（包括基因工程技术和蛋白质工程技术）制造的基因重组多肽、蛋白质类治疗剂。 重组基因的表达？ 克隆基因的表达 表达载体的构建 受体细胞的建立 表达产物的分离纯化 表达体系包括： 表达载体 原核表达载体 真核表达载体 宿主细胞 大肠杆菌、芽孢杆菌、链霉菌（原核） 酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞（真核） 1. 原核表达体系 (E.coli 表达体系) 标准： 选择标志 多接头克隆位点 强启动子 翻译调控序列 E.coli表达体系的不足： 不宜表达真核基因组DNA； 不能加工表达的真核蛋白质； 表达的蛋白质常形成不溶性包涵体(inclusion body) ； 很难表达大量可溶性蛋白。 大肠杆菌表达载体的结构 除了含有与克隆载体相同的元件之外，还必须含有表达载体所需要的其它元件: 启动子 是DNA链上能与RNA聚合酶结合并起始mRNA合成的序列 大肠杆菌表达系统常用的启动子有：lacZ启动子 强启动子 核糖体结合位点 SD序列（Shine-Dalgarno sequence）--mRNA中用于结合原核生物核糖体的序列。 SD序列与AUG之间的距离也会影