酶工程_01-酶和酶工程概论1.pptVIP

酶 和 酶 工 程 概 论 酶催化作用的特点 酶催化作用效率高 活化能：在一定温度条件下，1mol的初态分子转化为活化分子所需的自由能称为活化能，单位J/mol。 酶与非酶催化时所需的活化能示意图 图中酶催化反应和非酶催化反应的活化能差异显著 非酶催化反应 酶催化反应 活化能 反应过程 酶 和 酶 工 程 概 论 酶催化作用的特点三 酶促反应条件温和 酶促反应一般在pH 5～8水溶液中进行，温度范围为20～40 oC，即通常的生理条件； 高温或其它苛刻的物理或化学条件，将引起酶的失活。 原因： 酶催化所需活化能低。 酶是生物大分子，易变性而失活。 酶 和 酶 工 程 概 论 第三节 影响酶催化作用的因素 底物浓度 酶浓度 温度 反应体系pH值 抑制剂 激活剂 酶 和 酶 工 程 概 论 影响酶催化作用的因素一 底物浓度对酶活的影响 米氏方程（米彻利斯和曼吞） 当底物浓度较低时，酶促反应速率与底物浓度成正比，符合一级反应动力学。 当底物浓度很高时，反应速率不随底物浓度的改变而变化，符合零级反应动力学。 酶 和 酶 工 程 概 论 影响酶催化作用的因素二 酶浓度的影响 在底物浓度足够高的情况下，酶催化反应速率与酶浓度成正比： 酶 和 酶 工 程 概 论 影响酶催化作用的因素三 温度对酶反应速率的影响表现： 影响酶的稳定程度，酶蛋白在过高温度下将发生热变性； 影响最大反应速率； 影响酶和底物的结合； 影响酶和底物分子中某些解离基团的pKa值。 酶 和 酶 工 程 概 论 影响酶催化作用的因素 最适温度（optimum temparature） 酶反应速率随着温度的升高达到一个最大值时所对应的温度。 它不是酶催化反应的特征值，受作用时间、底物浓度、酶浓度及反应的pH等条件影响。 温度提高时，在反应速率增加的同时，酶蛋白变性失活的速率也迅速增加，所谓的最适温度，实际上是这两种因素综合影响的结果。 酶 和 酶 工 程 概 论 影响酶催化作用的因素四 pH值对酶反应速率的影响 多数情况下，酶反应速度随pH的变化呈钟罩形曲线。 最适pH（optimum pH） 酶反应速率随pH变化达到最大值时所对应的pH值。 不是常数，受许多因素影响。 酶 和 酶 工 程 概 论 影响酶催化作用的因素 pH对酶及其反应系统的影响表现： 1、改变酶空间构象，使酶可逆或不可逆变性失活 当酶液的pH值恢复到最适pH时，活力可完全恢复的称为可逆失活，反之，则称为不可逆失活。 2、改变反应系统的组成成分，主要是影响酶、底物和酶－底物复合物的结合/解离状态。 影响酶活性中心基团的解离状态，使底物不能分解为产物； 影响酶分子中底物结合部位的解离状态，使其不能与底物结合； 影响底物的解离状态，使底物不能与酶相结合，或结合后不能生成产物。 酶 和 酶 工 程 概 论 影响酶催化作用的因素五 抑制剂对酶反应速率的影响 凡能降低酶催化反应速率的物质都称之为抑制剂 抑制剂与酶的必需基团（包括活性基团及辅基）结合，改变其结构与性质，引起酶反应速率下降。（抗坏血酸抑制蔗糖酶） 抑制剂对酶有选择性，不包括酶蛋白的水解及变性失活作用。 酶抑制剂的特点: 在化学结构上与被抑制的底物分子或底物的过渡状态相似 能够与酶的活性中心以非共价或共价的方式形成比较稳定的复合物 酶 和 酶 工 程 概 论 影响酶催化作用的因素——抑制剂 抑制类型 不可逆抑制 抑制剂与酶的活性中心发生了化学反应，或共价地连接到酶分子的必需基团上，阻碍了底物的结合或破坏了酶的催化基团。 不能用透析或稀释的方法除去抑制剂，酶活性难以恢复。可逆抑制作用与时间有关。 可逆抑制 抑制剂与酶蛋白以解离平衡为基础，以非共价方式结合，引起酶活性暂时性丧失。 抑制剂可以通过物理方法（如透析等）被除去，并且能部分或全部恢复酶的活性。可逆抑制作用与时间无关。 酶 和 酶 工 程 概 论 影响酶催化作用的因素 可逆抑制作用的类型 竞争性抑制 非竞争性抑制 反竞争性抑制 酶 和 酶 工 程 概 论 影响酶催化作用的因素 竞争性抑制：是指抑制剂和底物竞争与酶分子结合而引起的抑制作用。 抑制剂In和底物S对游离酶E的结合有竞争作用，互相排斥。 酶 和 酶 工 程 概 论 影响酶催化作用的因素 竞争性抑制的速率曲线 酶 和 酶 工 程 概 论 影响酶催化作用的因素 非竞争性抑制：是指抑制剂与底物分别与酶分子上的不同位点结合而引起酶活性降低的抑制作用。 酶可同时与底物及抑制剂结合，引起酶分子构象变化，并导致酶活性下降。 这类物质并不是与底物竞争酶的活性中心，而是与非活性中心结合，所以称为非竞争性抑制剂。 酶 和 酶 工 程 概 论 影响酶催化作用的因素 非竞争性抑制的速率曲线 酶 和 酶 工 程 概 论 影响酶催化作用的因素 反竞争性抑制：是指在底物与