模拟失重条件下人体尿液代谢产物谱变化.docVIP

模拟失重条件下人体尿液代谢产物谱变化 　　【摘要】 目的：观察模拟失重条件下人体尿液代谢组学特征的变化。方法：采用-6°头低位卧床的方法建立人体模拟失重模型，被试者为15例健康成年男性，试验期间统一膳食，分别在卧床固定时间点采集尿液进行拉曼光谱检测，将其所得光谱数据通过PPF-PCA分析，观察卧床条件下各组尿液代谢产物谱的差异以及随时间的变化。结果：按卧床时间区分，被试者尿液代谢产物谱可划分为4种状态，状态1：R-10、R-2、R2；状态2：R4、R7、R14；状态3：R21、R30；状态4：R37、R44、R+7。状态1到状态4之间的差异有逐渐变大的趋势，状态之间的变化点依次为R4、R21、R37。结论：本试验中，被试者尿液代谢产物谱分别在卧床试验的第4天、第21天、第37天发生明显变化，此结果可为后续潜在代谢标志物的筛选以及营养干预措施的制定提供线索。 【关键词】 头低位卧床； 人体； 尿液代谢产物谱 中图分类号 R334 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2014）6-0148-02 营养健康不论对长期（30 d）航天特因环境下作业的航天员，还是对致力于解决各种航天医学问题的研究者，都是必须要首先考虑的问题。目前国内外对中长期太空飞行条件下机体营养代谢研究绝大多数局限在单个或几个营养素的宏观评价上，对作用机制的探讨还停留在推测阶段，而代谢组学从系统整体的思路的出发，通过对体液中营养代谢物的全面检测、筛选、反向追溯的途径，为航天营养学的深入广泛研究提供了应用前景[1-4]，也使实现我国航天员在轨营养监测、指导以及营养干预措施精确化制定成为了可能。本研究通过建立人体头低位卧床试验，对模拟失重条件下机体的尿液代谢变化产物谱的变化特点进行观察，现报道如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料 选取健康成年男性15例，年龄22～40岁，初中以上文化程度，身高160～175 cm，体重55～75 kg，无不良嗜好，本试验通过中国航天员中心人体医学试验伦理委员会的审议批准，志愿者在试验前均被告知试验要求，并签署了知情同意书。 1.2 方法 1.2.1 卧床要求 卧床试验时分为3个阶段：卧床前适应期10 d，卧床阶段45 d，起床后恢复期10 d，模拟失重条件的建立采用卧床头低脚高-6°的体位，除大便和称体重外，其他活动均在床上进行，允许绕身体纵轴变换体位。 1.2.2 试验者膳食及作息安排 试验期间志愿者统一饮食，食谱编制以中国居民平衡膳食宝塔为依据，食谱周期为7 d；卧床阶段志愿者每日的作息时间为早6∶00起床，晚22∶00熄灯，室温控制在22 ℃～26 ℃。 1.3 样本收集及处理 采集被试者的晨起中段尿，采集时间安排卧床前第10天（R-10）、第2天（R-2），卧床中第2天（R2）、第4天（R4）、第7天（R7）、第14天（R14）、第21天（R21）、第30天（R30）、第37天（R37）、第44天（R44），起床后第7天（R+7），共计11次，每人每次采集的尿量约0.5 ml。采集的尿样于离心机中，以14 000 r/m离心10 min后于拉曼光谱仪中检测。拉曼光谱分析仪工作参数设置：光谱采集范围为250 cm-1～2339 cm-1，扫描时间为10 s，扫描次数为2，平滑参数为1，每个样本重复检测两次。 1.5 主要试验仪器 拉曼光谱仪（型号Ramtracer-200，Optotrace公司），信噪比≥2000，波长准确度为1 cm-1。 1.6 统计学处理 拉曼检测数据均以TXT格式文件保存整理，数据处理采用中国航天员科研训练中心与中国农业大学联合研制的“拉曼光谱代谢组学分析系统”中的基于主成分和Fisher准则的投影方法（projection of basing on principal component and fisher criterion，PPF）进行数据处理，数据处理各环节中采用的数学方法和参数分别为：谱区分析范围采用400 cm-1～1600 cm-1，光谱预处理方法采用1阶导数和主成分分析，结果以光谱因子二维投影图表示。 2 结果 应用PPF方法得到11类尿液的二维投影图，见图1和图2。应用图1和图2中得到的类间距离可对不同尿样之间的相似程度（或远近关系）进行方便直观的评价，也可根据类内离散度对各类内样品的一致性进行客观的评价。依据PPF方法投影体现的样品间的距离关系，以相近可合，相远不合，考虑距离之间的连续性和过渡性等为参考指导原则，图2中所画的圆圈从左到右分别以各类投影均值为圆心，其半径表示类内投影值的离散度。可以看出：卧床者尿液代谢谱可以分为4种状态，即状态1：R-10、R-2、R2；状