反相高效液相色谱法测定人血清中维生素A含量.PDFVIP

文〔章编号〕1007一0893(2005)03一0175一03 反相高效液相色谱法测定人血清中维生素A含量 许 蕴 马经野 付 林 钱文片 王晓丽 史敦云 (深圳市第二人民医院中心实验室，广东深圳 518035) [摘 要〕 目的 建立反相高效液相色谱法测定人血清中维生素A的方法，以评价人体维生素A营养状况。 方法 移取血清，加入乙睛乙醇混合溶液及正己烷进行苹取，旋涡混合、离心后，移取正己烷层氮气吹干，残渣 用甲醇溶解后进样。色谱条件:XTerraTMRP,:色谱柱，5fm,3.9minx150mm，柱温:300C，流动相为甲醇: 水(92:8);流速:1mLJmin;检测波长325nm。结果 维生素A在25-800ng/mL浓度范围呈线性，R=0.9993, 平均回收率为95.2%,RSD7%，全部操作可在30min内完成。结论 改进的检测人血清中维生素A含量的方法， 快速、灵敏、准确，简便易行。 关〔键词夕维生素A;血清;HPLC (中图分类号〕R446 [文献标识码〕A DeterminationofVitaminA恤 HumanSerum 勿 RPHPLC XUYun,MAJingye,FULin,QIANWenjing,WANGXiao-h,SHIDunyun (CentralLaboratory,ShenzhenSecondPeoplesHospital,GuangdongShenzhen518035) (Abstract) Objective ToestablishaHPLCassayforthedeterminationofvitaminAinhumanserum andevaluatethenutritionalvalueofthebodysvitaminA.Methods Theserumwasextractedwithn-hexane aftertheproteinintheserumwasdepositedwithacetonitrile/alcohol.Thelayerofn-hexanewasdriedwithnitrogen, andtheleavingsdissolvedwithmobilephaseanddeterminedbyHPLC.VitaminAwasseparatedonXTerra7RP,, 5pin,3.9mmX150mmcolumn,anddetectedat325rimwithUVdetector勿usingmethanol/water(92:8)asmobilephase whenthecolumntemperatureat300C.Results Therangeofcalibrationcurveis25-800ng/nlL(R2=0.9993). Theaverageextractedrecoveryis95.2%,RSD7%.Thewholeoperationcanbefinishedinlessthan30minutes. ConclusionThemethodissensitive,rapi氏accurateandsimple. (KeyWords) VitaminA;Serum;HPLC 维生素A是人体正常代谢所必需的重要营养 的方法，此方法简单、灵敏、准确、快速，适宜作 素，具有重要的生理药理作用，主要用于治疗维生 为常规临检项目开展。 素A缺乏病、皮肤病和肿瘤。视黄醇是维生素A在 1 仪器与方法 体内的主要活性形式。我们对有关文献的方法加以 1.1 仪器与试剂 改进，建立了高效液相色谱测定血清中视黄醇含量 Watersalliance2695型高效液相色谱仪，Waters 收〔稿日期〕2005-03-04 作〔者简介〕许蕴((19“一)，女，天津市人，高级工程师，主要从事高效液相色谱研究工作。 175 2487型紫外检测器，BESEP氮吹板，低速大容量离 1.2.3 血中维生素A浓度的测定方法 取血清 心机，涡旋振荡器。