河南省病毒性脑炎流行病学与病原学调查.pdfVIP

山求人学坝{：学位论定 中蚊种的构成，找出优势蚊种。 4．利用BHK和Vero细胞培养的方法对蚊子携带的病毒进行分离。 LS 5．用TRIZOL Reagent提取分离到病毒的RNA，再用常规PCR和荧光 PCR方法进行初步鉴定。 结果： 1．河南省乙型脑炎发病情况同我国总的情况基本一致．自20世纪70年代 后期大规模使用乙脑疫苗后，除1990与1991年有个小发病高峰外，乙脑发病 率在显著下降，2004年发病率达到了O．39／10万；发病具有明显的季节性，85％ 以上病例发生集中在7、8、9三个月，这与我省蚊虫出现随季节性变化而变化 的特点相一致；病例主要分布于气温相对较高，雨量相对偏多的豫南、豫东南 的信阳、驻马店、南阳市、周口市以及商丘的部分地区，平顶山、洛阳、偶有 集中发病，黄河以北地区发病相对减少。年龄分布主要集中于lO岁以下儿童， 占80％以上，5岁以下病例约占50％，男女性别比为1．4：l。 2．本次实验在我省不同生态环境中共捕获蚊虫25787只，其中库蚊18999 只，按蚊2715只，伊蚊85只，阿蚊3878只．库蚊占全部蚊虫的73．7％，按蚊 占10．5％，伊蚊03％，阿蚊占15％，可见库蚊为我省优势蚊种．山区、平原和 湿地均以库蚊为主，山区及湿地未能捉到伊蚊；而丘陵地区按蚊和阿蚊为优势 蚊种，库蚊和伊蚊较少；在黄河湿地阿蚊也占一定比例． 3．随机将每个生态环境中所捕蚊子取出lO管，组成一个组，研磨接种细 胞，进行病毒分离．共分离到8株可疑病毒，均能引起BHK细胞和Vero细胞 山东夫学颂I：学位论史 稳定病变。BHK细胞病变以圆缩和脱落为主，而Veto细胞病变以聚集、拉网、 圆缩为主。出现病变时一般在48～72小时之间．均具有滤过性(o．22ttm滤过膜)， 其中4株病毒带回北京进行鉴定，其余4株病毒经常规PCR及荧光PCR鉴定 发现有一株为乙型脑炎病毒。 结论： 河南省于1953年从病人的脑组织中分离到了乙脑病毒，1991年在河南省新 安县采集了淡色库蚊300只、阿蚊450和三带喙库蚊30只，利用细胞和乳鼠对 全部标本进行了病毒分离，结果从淡色库蚊中分离出1株病毒，经间接免疫荧 光试验、中和试验等鉴定为乙型脑炎病毒，是河南省首次证明库蚊是乙脑的传 播媒介，但未能对分离到的病毒进行核酸测序及鉴定。本次调查实验再次证实 库蚊是河南省的优势蚊种，并且是乙型脑炎的主要传播媒介，分离到的病毒经 常规PCR及荧光PCR等鉴定初步认为是乙型脑炎病毒，为动物实验、病毒核 苷酸测序、判断乙型脑炎病毒的分型以及分析目前所用的乙脑减毒活疫苗对本 次实验所分离到的病毒是否有保护作用打下基础。 关键词：病毒性脑炎；病毒分离；乙型脑炎病毒；库蚊；PCR。 山东大学硕t学位论丈 ANDETIOLOGICSTUDYOF EPIDEMIOLOGIC INHENANPROⅥNCE JAPANESEENCEPHALITIS MPHStudent：LiWeibin Director：Jia Chongqi Director：Hao Zongyu ABSTRACT objeetives 1．Onthebasisofthe dataofour which Japaneseencephalitis provincereported overthe ofthe ofour was